实验室有毒有害试剂使用的减量化探索

生物类学科以大量实验为基础，试剂在实验过程中必不可少。试剂的选取不仅需要制订切实可行的实验方案、满足实验需求，还需尽量减少试剂尤其是有毒有害试剂的使用，以最大限度保障实验人员的健康安全，降低实验过程对环境造成的危害。

2.1 植物基因组DNA提取实验中有毒有害试剂使用的减量化生物类实验室涉及多种有毒有害生化试剂，在实验中应采用无污染或少污染的新工艺、新设备、无毒无害或低毒低害的原材料，尽可能减少危化品的使用。以生物学科中新兴的、最具活力的学科—分子生物学为例，实验室在核酸提取过程中尝试探索减少有毒有害试剂的使用，如在蛋白质变性步骤中采用低毒的DTT(二硫苏糖醇)替代具强烈刺激性气味的有毒试剂β-巯基乙醇、去除杂蛋白步骤中采用纯氯仿替代苯酚/氯仿/异戊醇(25∶24∶1)、沉淀DNA步骤中采用乙醇替代挥发慢且毒性二倍于乙醇的异丙醇。本研究对处理前后提取的DNA质量及其在下游PCR(聚合酶链式反应)中的表现进行评估，发现改良后的DNA提取质量未受影响，取得了较好的实验效果；同时筛选出分子生物学实验教学中更为环保、安全、可行的植物基因组DNA提取方法，并已在实验教学中进行推广应用(见图1)。

图1(a)是不同方法提取的DNA样品，其中，1、2是CTAB法提取的DNA；3、4是改良CTAB I法提取的DNA(将β-巯基乙醇改为DTT，将苯酚-氯仿-异戊醇 (25∶24∶1) 改为氯仿，将异丙醇改为乙醇，其余同CTAB法)；5、6是改良CTAB II法提取的DNA(在改良CTAB I法的基础上去掉DTT，其余同改良CTAB I法)；7、8是试剂盒法提取的DNA。图1(b)是不同方法提取的DNA扩增反应结果，其中，1、2是CTAB法提取DNA的PCR产物；3、4是改良CTAB I法提取DNA的PCR产物；5、6是改良CTABII法提取DNA的PCR产物；7、8是试剂盒法提取DNA的PCR产物。