测定雪糕中甜蜜素的不确定度评定-VORTEX-5使用

0 引言

不确定度反映了在检测过程中由误差导致的实 际值出现偏差的大小程度，是检测结果准确程度的 一种评价指标和方式。检测机构在出具试验报告的 同时出具该检测项目的不确定度说明，能够更加确 切地说明该实验室所具有的检测能力及技术水平， 因此评定一个检测项目的不确定度在试验方法、流 程及试验结果中扮演着至关重要的角色，在实际检 测中不容忽视。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

7890B 型气相色谱仪，安捷伦科技有限公司产 品；LE204E 220 g/0.1 mg 型电子天平，梅特勒 - 托 利多仪器 （上海） 有限公司产品；SK8200HP 型超声波清洗机，上海科导超声仪器有限公司产品；VORTEX-5涡旋混合器，海门市其林贝尔产品； LD5- 2B 型离心机，北京京立离心机有限公司产品。

1.1.2 试剂

氢氧化钠 （分析纯），成都市科隆化学品有限公 司提供；正己烷 （色谱纯），上海星可高纯溶剂有限公司提供；氯化钠 （分析纯）、浓硫酸 （分析纯）、 硫酸锌 （分析纯）、亚硝酸钠 （分析纯）、亚铁氰化 钾 （分析纯），国药集团化学试剂有限公司提供。

1.2 检测方法

按照国家标准 GB 5009.97—2016 《食品安全国 家标准 食品中环己基氨基磺酸钠的测定》 第一法 气 相色谱法检测方法，称雪糕样品 5 g 于 50 mL 离心 管，加水 30 mL，超声提取 30 min，加入 2 mL 亚铁 氰化钾和 2 mL 硫酸锌溶液，混匀沉淀蛋白后以转速 3 000 r/min 离心 10 min，过滤，收集滤液并用水定 容至 50 mL，混匀备用。取收集液于 50 mL 离心管 中，冰浴冷却 5 min 后加入正己烷，混匀后加入 2.5 mL 亚硝酸钠溶液和 2.5 mL 硫酸水溶液，混匀 后冰浴环境下衍生 30 min，衍生期间振荡 3~5 次以 确保衍生完全。衍生后加入适量氯化钠，混匀后以 转速 3 000 r/min 离心 10 min，取上清液上机分析。

1.3 标准曲线的配制

取甜 蜜 素 标 准 溶 液 （10.0 mg/mL） 50， 100， 200，500 μL 和甜蜜素标准溶液 （1.0 mg/mL） 100， 200 μL，用超纯水定容至 10.0 mL，得到 10，20， 50，100，200，500 μg/mL 的标准工作液，并同样品 一起衍生。 1.4 仪器条件 色谱柱 HP- 5 （30 m×320 μm×0.25 μm）；进样 口温度 230 ℃，分流比 5∶1，升温程序为初始温度 55 ℃保持 0 min，以 10 ℃/min 速率升至 90 ℃保持 0.5 min，以 20 ℃/min 速率升至 200 ℃保持 3 min，进 样量 1 μL，检测器温度 260 ℃，色谱柱流量 1 mL/min， 氢气流量 30 mL/min，空气流量 330 mL/min。

2 数学模型建立

结合测定试样中甜蜜素的计算公式、检测方法 和实际操作对其不确定度来源分析可知，采用气相 色谱法测雪糕中甜蜜素含量，影响试验结果的不确 定度因素主要包括称取样品误差，试样定容误差， 标准溶液配制、标准工作曲线配制、标准曲线拟合 引入的误差，试验过程中回收率引入误差。

3 各不确定度分量的分析及计算

标准品在配制过程中，所使用的定容容器和环 境温度的变化是引入不确定度的主要来源，具体分 析如下： （1） 标准品配制过程中由定容容器引入的不确 定度。标准品在配制过程中需使用 A 级容量瓶 （10.0 mL） 和 A 级单标线吸量管 （5.0 mL），依据 JJG 196—2006 常用玻璃量具检定规程，A 级容量瓶 （10.0 mL） 的最大允许偏差为±0.020 mL，A 级单标 线吸量管（5.0 mL） 最大允许偏差为±0.015 mL，按 照矩形分布原则。
定度。在标品配制过程中，环境温度的变化也会 影响标准溶液配制的准确性，从而产生不确定度。 依照 JJG 196—2006 常用玻璃量具检定规程，玻璃量 器最佳使用环境温度为 20 ℃，而实验室环境温度保 持在 20±5 ℃，在 20±5 ℃温度范围下，水的体积 膨胀系数为 2.1×10- 4，此系数远大于玻璃器具的体 积膨胀系数，因此在实际检测过程中，环境温度变 化对玻璃器具体积的影响可忽略，按照矩形分布原 则。