海门市其林贝尔分析柚皮素纳米混悬剂的制备的

柚皮素是一种二氢黄酮类化合物，广泛存在于 芸香科植物中，具有抗病毒、抗氧化、抗炎、镇 咳、抗肿瘤、抗纤维化、预防动脉粥样硬化等多种 药理活性，显示出巨大的潜在利用价值，但其 溶解度不理想，导致体内吸收较差，口服后药 效大打折扣。

1 材料

Agilent 1260 型高效液相色谱仪 ( 配置 DAD 检 测器，美 国 Agilent 公 司) ; AＲ2140 型 电 子 天 平 ［梅 特 勒-托 利 多 仪 器 ( 上 海) 有 限 公 司］; DF101S 型集热式恒温加热磁力搅拌器 ( 郑州长城科 工贸有限公司) ; VOＲTEX-5 型涡旋混合器 ( 海门市其林贝尔仪器制造有限公司) ; ATS 型均质机 ( 加拿大 Seeker 公司) ; ＲE5299 型旋转蒸发仪 ( 上海亚荣生化仪器厂) ; MD200-2 型氮气吹扫仪 ( 杭 州奥威仪器有限公司) ; Master-sizer 型粒度分析仪 ( 英国马尔文仪器有限公司) 。 柚 皮 素 原 料 药 ( 批 号 20170223， 含 有 量 98. 7%，西安瑞迪生物科技有限公司) ; 柚皮素对 照品 ( 批号 Y-034-181217，成都瑞芬思生物科技 有限公司) ; 卵磷脂 ( 批号 PC-98T，辅必成上海医 药科技有 限 公 司) ; 聚乙烯吡咯烷酮 K30 ( PVPK30，批号 25000240379，亚什兰集团公司) ; 肝素 钠 ( 批号 20160511S，新泰市朝阳生化研究所) 。 清洁级 SD 大鼠，雌雄兼用，体质量 ( 300 ± 20) g，河南省动物实验中心，动 物 许 可 证 号 SCXK ( 豫) 2016-0001。

2 方法与结果

BDS-C18 色 谱 柱 ( 250 mm×4. 6 mm，5 μm) ; 流动相甲醇-水 ( 65 ∶ 35) ; 体积流量 1. 0 mL /min; 柱温 30 ℃ ; 检测波 长287 nm; 进样量 20 μL精密量取纳米混悬液 0. 5 mL，加入 10 mL 甲醇超声 5 min，即得。测得柚皮素峰面积 ＲSD 为 0. 64%，表明溶液在 48 h 内稳定性良好。取 1. 0、100. 0、200. 0 μg /mL 对照 品溶液，连 续 6 d，测得日内精密度 ＲSD 均小于 0. 52%，日间 精密度 ＲSD 均小于 1. 33%，表明该方法精密度良 好。平行制备 6 份供试品溶液，测得柚皮素峰面积 ＲSD 为 1. 39%， 表明该方法重复性良好。空白纳米混悬液分别配制成 40、60、80 μg /mL，测得柚皮素平均加样回收率为 99. 36%，ＲSD小于 1. 80%。取对照品溶液逐步稀释，测得检测限为 0. 5 ng /mL，定量限为 1. 2 ng /mL。在制备温度 25 ℃、均质 压力 60 MPa、均质次数 10 次的条件下，考察 PVP K30、卵磷脂、两者混合物 ( 1 ∶ 1) 对纳米粒粒径 的影响。结果，平均粒径分别为 ( 281. 42±5. 93) 、 ( 224. 79 ± 6. 07 ) 、( 182. 50 ± 4. 11 ) nm，故 选 择 PVP K30-卵磷脂混合物 ( 1 ∶ 1) 作为表面活性剂。在表面活性剂 PVP K30-卵磷脂 ( 1 ∶ 1) 、制备温度 0 ℃、均质次数为 10 次的条件 下，考察均质压力 40、60、80、100 MPa 对纳米粒 粒径的影响。在均质压力 40 ～ 80 MPa 范围内粒径逐渐变小，但 增 大 至 100 MPa时 反 而 上 升，故 选 择 80 MPa 作 为 均 质 压力。

3 讨论

在制备纳米混悬剂过程中，有机溶剂与水互溶 程度越高，搅拌条件下两相混合时扩散越快，越有 利于小粒径纳米粒快速形成，综合考虑溶解度、毒 性等因 素，选择无水乙醇作为制备溶剂。据报道，沉淀法制备纳米粒是放热过程，温度较高 时会增加纳米粒子之间碰撞机会，容易出现晶体成 长和纳米粒聚集，故较低的制备温度有助于获得粒 径、PDI 均较小另外，制备时需加入一定量表面活性剂，通过 吸附于药物粒子表面来提供电荷排斥作用或立体位 阻作用，从而防止纳米粒聚集，提高稳定性。前期 预实验对泊洛沙姆 188、聚山梨酯 80、聚乙烯醇等 进行了筛选，发现所得纳米粒粒径均较大，其原因 可能是这些表面活性剂不能吸附于纳米粒表面，无 法提供电荷排斥作用或立体位阻作用。由于表 面活性剂联合应用可提高纳米粒长期稳定性， 故实验选择 PVP K30-卵磷脂 ( 1 ∶ 1) ，此时所制备 的纳米粒粒径较小。



 

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