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其林贝尔涡旋混合器代谢组学研究

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-11-09 09:26【

材料与方法


乙腈( 质谱级,美国 Fisher 公司,批号: 142146) 、甲酸( 质谱级,美国 Fisher 公司, 批号: 140362) ,蒸馏水( 屈臣氏) 。美国 UPLC - Q - TOF 仪( Waters,SYNAPT G2 UPLC - Q - TOF) ; VOR - TEX - 5 涡旋混合器( 江苏海门其林贝尔仪器制造有 限公司) ; MIKR022R 台式高速冷冻离心机 ( LAB - WAYSCIENCE,德 国) 。实 验 用 药: 盐 酸 克 林 霉 素 ( CAS321462 - 39 - 5,UPS 级,83% ,800 μg /mg) ; 大黄( 产地: 甘肃) 购于北京中医药大学东方医院中药房。

旋涡混合器VORTEX-5


代谢组学检测


与空白对照组大鼠比较, AAD 组大鼠大便次数增多、大便稀薄,毛失去光泽,活 动减少,肛周有污物,便涂片示球菌/杆菌比异常; 脾阳 虚证组大鼠,神疲乏力,反应迟钝,行动缓慢,被毛蓬起 无光泽,弓背、扎堆,肛温下降、便溏,肛周污秽,毛色枯 槁无光泽。两组造模均成功。分析前,将冻存的血清于 37 ℃ 复融 2 min,各取 200 μL 血清于 EP 管,加入 600 μL 乙 腈,涡旋 10 min。4 ℃ 下 12 000 r/min 离心 10 min 去 除蛋白。吸取上清液 700 μL 于新的 EP 管,氮气吹干, 样品保存于 - 20 ℃冰箱冷藏,待检测。各血清样品分 别抽取 40 μL 混匀通过上述制备方法得到质量控制 ( QC) 样品。氮气吹干的样品,分别加入 10% 乙腈 200 μL 于 EP 管复溶,4 ℃ 下 12 000 r/min 离心10 min,取 上清液 150 μL 于进样小管,等待进样。






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