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口服给药简单，方便，患者依从性高，是药物递送 的最优选途径。但目前超过 40%市售药物、60%研发 中药物都存在难溶性问题。得益于载体辅料的开发应 用，改善疏水性药物的溶解性和生物利用度已有多种方法，如: 使用磷脂复合物、生物相容性聚合物、固体分 散体、脂质体或胶束等。但目前满足上述方法要 求、符合中药成分特性的辅料尤为缺乏。本课题组前 期发现一些糖基化苷类化合物在水性环境中，能够形 成与表面活性剂相似的结构，可作为固体分散体的载 体，实现难溶性药物的高效增溶。罗汉果甜苷是罗 汉果的甜味成分。植物含量较高且水溶性好，目前已 经有纯度 98%以上成品用作食品添加剂，其甜度为蔗 糖的 300 倍。罗汉果苷 V 是罗汉果甜苷的主要成分， 是一种天然小分子化合物，由亲水性葡萄糖基和疏水 性三萜类两部分组成，与已报道的糖苷类增溶载体结 构相似，故选其为载体，以研究其对难溶性药物的增溶 效果。罗汉果苷 V 甜度高，热稳定性好，色泽浅，易于使用，不受 pH 值( pH 值在 2～10) 的影响。它在中国、 美国、日本等一些国家作为非营养性天然甜味剂而闻 名。同时，含葡基辅料还可能通过与葡萄糖转运体 1( glucose transporter 1，GLUT1) 结合实现跨越血-脑屏 障，进而实现对目标药物的脑靶向转运。
LC-2010CHT 液相色谱仪( 含高压泵、柱温 箱、自动进样器、紫外检测器、LC solution 色谱工作站， 日本岛津公司) ; KQ-250DE 型数控超声波清洗器( 昆山市超声仪器有限公司) ; BT125D 电子天平( 北京赛多利斯科学仪器有限公司，感量: 0．01 mg) ; XW-80A 旋涡混合器( 海门市其林贝尔仪器制造有限公司) ; 旋 转蒸发装置( 含 N-1100 型旋转蒸发仪、OSB-2100 型油 浴锅，上海爱朗仪器有限公司) ; SHB-Ⅲ循环水式多用 真空泵( 郑州长城科工贸有限公司) ; DKZ 系列电热恒 温振荡水槽( 上海一恒科技有限公司) ; 2XZ-2 型旋片 式真空泵( 临海市永昊真空设备有限公司) ; 差示扫描 量热仪 NETZSCH DSC 204( NETZSCH GEＲAETEBAU GmbH) 等。
紫杉醇对照品( 阿拉丁，含量: 99%，批号: E1822047) ; 罗汉果苷 V( 成都普瑞法科技开发有限公 司，含量: 98%，批号: PＲF8093001) ; 去离子水; 乙腈为 色谱纯; 其他试剂为分析纯。
取紫杉醇适量，按 1∶5，1∶10，1∶15，1∶20( W/W) 添加相应 量的罗汉果苷 V，置于研钵中研细，混匀，置干燥器中 备用。
采用溶 剂法制备紫杉醇-罗汉果苷 V 固体分散体，按 1∶20 ( W/W) 称取适量紫杉醇和罗汉果苷 V，加入适量的 80%乙醇，常温下 50 Hz 超声 30 min，置于 50 ℃ 水浴 锅中进行减压浓缩干燥 60 min，即可得到固体分散体。 得到固体状固体分散体，用研钵研磨均匀，置干燥器中 备用。
色谱柱: Inertsil ODS-3( 4．6 mm × 250 mm，5 μm) ; 柱温: 30 ℃ ; 检测波长: 227 nm; 流速: 1 mL·min-1 ; 流动相: 乙腈-水( 65∶35) 。
精密称定紫杉醇 10 mg，置于 10 mL 棕色量瓶中，加入乙腈 5 mL，超声 使其溶解，用乙腈定容，配制得浓度约为 1 mg·mL－1 紫杉醇对照品溶液。
精密称定罗 汉果苷 V 10 mg，置于 10 mL 棕色量瓶中，加入乙腈 5 mL，超声使其溶解，用乙腈定容，配制得浓度约为 1 mg·mL－1 罗汉果苷 V 对照品溶液。
精密称定紫杉醇-罗汉果苷 V 固体分散体 10 mg，置于 10 mL 棕色量瓶中，加入乙腈 5 mL，超声使其溶解，用 乙腈定容，配制得浓度约为 1 mg·mL－1 紫杉醇-罗汉果 苷 V 固体分散体溶液。
分别取空白溶剂、罗汉果苷 V 对 照品溶液、紫杉醇对照品溶液和紫杉醇-罗汉果苷 V 固 体分散体溶液，按“2．3．1”条件，进行 HPLC 分析，紫杉 醇典型色谱图见图 1。结果表明，在本色谱条件下，紫 杉醇峰形良好，保留时间约为 6．8 min，空白溶剂和罗 汉果苷 V 对主峰的测定无干扰。
取“2．3．2”项制备的紫杉醇 对照品溶液，按一定比例稀释，得到一系列浓度溶液， 进行 HPLC 分析，紫杉醇检测限( S /N= 3) 和定量限 ( S /N= 10) 分别为 20 ng·mL－1 和 50 ng·mL－1 ( n = 5) 。 2．3．7 线性关系考察 取“2．3．2”项制备的紫杉醇对 照品溶液，按一定比例稀释，得到浓度分别为 0． 05， 0．1，0．2，1，5，10，25，50 μg·mL－1 的标准液，按“2．3．1” 项条件进行 HPLC 分析，以紫杉醇峰面积( A) 为纵坐 标，紫杉醇浓度( C，μg·mL－1 ) 为横坐标进行线性回 归，结果表明紫杉醇在 0．05 ～ 50 μg·mL－1 内线性关系良好，回归方程为: A = 44 827 C+387．46，Ｒ2 = 1．000 0。
精密量取“2．3．2”项制备紫杉醇 对照品溶液 0．5 mL，置于 100 mL 量瓶中，加流动相定 容，得到 5 μg·mL－1 紫杉醇溶液。按“2．3．1”项方法重 复测定 6 次，结果峰面积稳定，ＲSD 为 0．8%，表明仪器 精密度良好。
取紫杉醇-罗汉果苷 V 固体分散 体( 1∶20) 约 20 mg，共 6 份，精密称定。置于10 mL量 瓶中，加适量乙腈溶解并定容。精密量取 0．5 mL，置 10 mL 量瓶，加流动相定容。配制得相当于紫杉醇含 量 5 μg·mL－1 溶液。按“2．3．1”项方法测定，计算 6 份 样品中的紫杉醇含量。测定 6 份固体分散体中紫杉醇 的含量分别为 4．3%，4．2%，4．3%，4．4%，4．4%，4．3%， ＲSD 为 1．3%，表明该方法重复性良好。
取“2．3．9”项下含紫杉醇 5 μg· mL－1 的紫杉醇-罗汉果苷 V 固体分散体溶液，室温下放 置 0，2，4，6 h，按“2．3．1”项方法分别测定，紫杉醇峰面 积 ＲSD 为0．06%，表明紫杉醇溶液在室温下 6 h 内稳 定。
参考文献方法，分别 精密称取紫杉醇适量，按处方比例( 1∶20) 添加罗汉 果苷 V，分 别 制 成 高、中、低 浓 度 溶 液 各 3 份，按 “2．3．1”项方法测定。分析结果见表 1，加样回收率在 97．9% ～101．5%，方法准确度良好。
笔者在本研究以食品添加剂罗汉果苷Ⅴ为固体分 散体的载体，考察不同投药比例对紫杉醇增溶效果的 影响。以药物增溶倍数为指标，筛选出最佳的固体分 散体投药比例为 1∶20( W/W) 。同时，本研究建立了 灵敏度高、准确度好、检测范围广的 HPLC 法，用于测 定制剂中紫杉醇的含量。另外，通过 DSC 分析法验证 紫杉醇在固体分散体中以无定形或微小晶体形式存 在，显示出该制剂中紫杉醇的增溶机制是改变其难溶 性的晶体结构及降低晶体的大小。饱和溶解度和体外 溶出的实验结果表明，以罗汉果苷 V 为载体，能有效 提高难溶性药物紫杉醇的溶解度，进而改善其溶出速 率和累积溶出度。
