漩涡振荡器在奋乃静缓释微球药动力学研究中的

奋乃静为吩噻嗪类的哌嗪衍生物，白色或淡黄色结晶粉末，临床为精神障碍类药物，有较强的副作 用，限制了临床应用范围 。聚乙二醇是乙二醇的高分子聚合物，生物降解性好、无毒副作用 。聚 乙二醇修饰的奋乃静药物，制备成注射型缓释微球制剂，通过肌肉注射小鼠局部给药，对聚乙二醇奋乃 静接枝物缓释微球进行了小鼠体内药动学研究，能够起到较好的缓释效果。

高效液相色谱仪（日 本 岛 津 株 式 会 社 ＬＣ－１０ＡＴ 型）、ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱 柱（北京迪马科技有限公 司）、柱温箱（天津威仪科技有限公司）、台式高速离心机（湖南星科科学仪器有限公司）、电子分析天平 （上海舜宇恒平科学仪器公司）、漩涡振荡器（海门市其林贝尔仪器有限公司）、实验室超纯水仪（西安优 普仪器设备有限公司）、电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）。

奋乃静原料药（湖北鑫润德化工有限公司）、奋乃静缓释微球（自制）、邻苯二甲酸二乙酯（分析纯）、 甲醇（色谱纯）、三乙胺（分析纯）、醋酸（分析纯）、二氯甲烷（分析纯）、小鼠（哈尔滨医科大学）。

精确称取奋乃静原料０．２５ｇ置于小烧杯中，用甲醇溶解，将溶液转移入２５０ｍＬ棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成１．００ｍｇ／ｍＬ的储备液 Ａ；精确移取储备液 Ａ２．５ｍＬ于２５０ｍＬ棕色容量 瓶中，摇匀稀释至刻度，配制成１０μｇ／ｍＬ的储备液 Ｂ；均置于冰箱４ ℃下保存，待用 。经实验摸索，用邻苯二甲酸二乙 酯为内 标 物。精 确 称 取 邻 苯 二 甲 酸 二乙酯０．２５ｇ，置于２５０ｍＬ 棕色容 量瓶 中，用 甲 醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度， 配制成１．００ ｍｇ／ｍＬ 的邻 苯 二 甲 酸 二乙酯甲 醇 溶 液 Ａ。精 确 移 取 邻 苯 二甲酸二乙酯甲醇溶液 Ａ２．５ｍＬ于 ２５０ ｍＬ 棕 色 容 量 瓶 中，得 到 １０ μｇ／ｍＬ的邻苯 二 甲 酸 二 乙 酯 的 甲 醇 溶液 Ｂ。置 于 冰 箱 ４ ℃ 下 保 存，待用。

色谱柱 为 ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８柱（２５０ ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相为ｐＨ 为３．４的缓 冲 液（５００ ｍＬ 超纯水中空白血浆中加内标物邻苯二甲酸二乙酯高效液相色谱图 加入２ ｍＬ 三乙 胺，用 冰 醋 酸 调 节 ｐＨ 为３．４）－甲 醇 （３２：６８）；流 速 ０．８ ｍＬ／ ｍｉｎ；柱温３０℃；检测波长２５８ｎｍ；进样 量２０μＬ。

精确 抽 取 ０．２５ ｍＬ 血浆 样 品 放 到 锥形离心管中，精确滴入甲醇０．１５ｍＬ， 漩涡震荡３ｍｉｎ，离心机１００００ｒｐｍ 转 速高速 离 心１０ ｍｉｎ，滤去 混 浊 物，转 移 上清液至 另 一 离 心 管，在 ８０ ℃ 水浴 条 件下 挥 干 甲 醇，再 向 该 离 心 管 中 滴 加１ ｍＬ 二氯甲烷，涡旋振 荡３ ｍｉｎ，离心 机 １００００ｒｐｍ 的转速高速离心１０ｍｉｎ，滤 去混浊物，得 到 清 液，５０ ℃水浴 条 件 下 挥干二氯甲烷。向离心管中加入０．２５ｍＬ 流动相复溶，０．２２μｍ 微孔滤膜过滤，高效液相色谱进样２０ μＬ。

昆明种小鼠，共４０只，雄鼠２０只，雌鼠２０只，实验前禁食１２ｈ，给药４ｈ后统一喂食。

按照成人体重奋乃静的给药剂量换算，按２０天计算小鼠给药剂量，每只小鼠注射聚乙二醇奋乃静 接枝物的缓释微球的剂量为２３ｍｇ（含奋乃静药０．３ｍｇ），即精密称取２３ｍｇ聚乙二醇奋乃静接枝物的 缓释微球４０份，分别置于１．５ｍＬ 离心管中，加入０．１ｍＬ 注射级大豆油，涡旋震荡３ｍｉｎ，超声震荡５ ｍｉｎ，得聚乙二醇奋乃静接枝物的缓释微球注射剂。用１ｍＬ注射器抽取注射剂，分别给每只小鼠注射奋乃静缓释微球后平均血药浓度－时间曲线 腿外侧皮下注射缓释药物 。

从给药时刻开始计时。在给药后０．５天，１天，３天，５天，７天，９天，１１天，１３天，１５天，２０天从小鼠 眼眶取血０．５ｍＬ，将取出的血浆立即移入内部涂有肝素的小离心管中，３０００ｒｐｍ 离心１０ｍｉｎ，分离得 到血浆，放置在冰箱４ ℃中保存 。每次取４只小鼠的血样，高效液相色谱仪进样分析，代入标准曲 线，取四个样品的血药浓度平均值。

按照上文的血浆样品处理方法进行操 作，以邻苯二甲酸二乙酯为内标物，记录奋 乃静的峰面积和邻苯二甲酸二乙酯的峰面 积，取比值代入奋乃静血浆标准曲线。 小鼠在 注 射 奋 乃 静 缓 释 微 球 之 后，各 时间点血药浓度的平均值与时间的关系。 注射奋乃静缓释微球制剂第５天左右小鼠血药浓度达到高值，奋乃静血药浓度约为５５ｎｇ／ｍＬ，且在其后８天血药浓度较为平稳，奋乃静血药 浓度维持在５５～６０ｎｇ／ｍＬ之间，在注射奋乃静缓释微球制剂后１３天血药浓度开始下降，奋乃静血药 浓度为５０ｎｇ／ｍＬ，注射奋乃静缓释微球制剂２０天后，奋乃静血药浓度为３０ｎｇ／ｍＬ。效果较为理想。