针刀松解联合丹参注射液-其林贝尔振荡器使用

0 引言

膝骨关节炎是常见于中老年人群的一种以退行性改变 为主的常见病、多发病，一般认为属于中医学“骨痹”类， 其发病原因目前尚未完全阐明。有研究显示膝骨关节炎的 发病与高龄、女性、体质量指数、关节外伤、关节过度使 用、骨密度、肌力等因素高度相关。中国目前已进入老 龄化社会，膝关节骨性关节炎作为中老年人的常见病，其 发病率也较高。上海有学者通过调查1 499名对象研究得出 结论，年龄≥40岁者膝骨关节炎患病率为33.3%。肾脏阴 阳两虚、外感寒湿、肝气虚、阴虚、气虚、阳虚、瘀血是 “骨痹”最常见的病机因子。

1 材料和方法

1.1 设计

随机对照动物实验。

1.2 时间及地点

于2014年2至4月在黑龙江中医药大学 实验动物中心进行实验并采集观察指标。

1.3 材料

1.3.1 实验动物

健康4周龄雄性新西兰大白兔50只，体 质量(1.2±0.1) kg，平均1.2 kg，由黑龙江中医药大学实验 中心提供。实验动物生产许可证号：SCXK(黑)2013-004， 实验动物使用许可证号：SYXK(黑)2013-012，实验过程中 对所有动物的处置依照《关于善待实验动物的指导性意见》 中的相关规定。实验方案经黑龙江中医药大学动物实验伦 理委员会批准。

1.3.2 主要实验药材、试剂及仪器

一次性独立包装汉章 针刀Ⅰ型4号φ0.25 mm×30 mm，(北京华夏针刀医疗器械 厂，药(械)准字：2011第2270164号)；丹参注射液，规格：10 mL/支(正大青春宝制药，国药准字Z33020177)； utrao-SM 800全自动酶标仪(上海永创医疗器械有限公 司)；石蜡切片机(U-641型，美国贝克曼公司)；光学显微 镜照相系统(BH-5型,日本Olympus公司)；数码X光机 (CEx86型，美国GE公司)；微型振荡器MH-1型(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)；小型高速离心机(Eppendorf 中国有限公司)；兔白细胞间介素ELISA试剂盒(欣博盛，货 号RBE015)，兔肿瘤坏死因子ELISA试剂盒(欣博盛，货号： RBE102a.48)；低糖型DMEM细胞培养液(北京博奥森生物 技术公司)；40 g/L多聚甲醛(山东省寿光市旭东化工有限公 司，CAS号：30525-89-4)；灭菌注射用水(5 mL，石家庄 第四制药有限公司) 。

1.4 实验方法

1.4.1 实验动物分组及造模

将50只健康新西兰白兔随机 分为5组进行实验：空白对照组、模型组、单纯丹参注射液 组、单纯闭合针刀松解组(针刀组)、闭合针刀松解结合丹参 注射液组关节腔注射组(针刀联合丹参注射液组)，每组各10 只。所有动物同等条件下饲养1周，稳定后，除空白对照组 外其他4组兔均参考张子峰等报道的方法造模：将兔取左 侧卧位，于右侧髋关节大转子后约1 cm处为中点，上下直切 口3 cm，分离髂内静脉属支臀下静脉，双重结扎，结扎线 间切断。仰卧位，右侧腹股沟触及动脉搏动处作1 cm纵形切 口，分别分离股静脉、大隐静脉，分别双重结扎后于结扎线 间切断。于右侧膝关节间隙水平切断腓肠肌内、外侧头，切 除5 mm长一段跟腱。所有手术切口缝合皮下组织、皮肤后 敷盖乙醇纱布、棉垫。造模后连续3 d注射青霉素5 U/(kg•d)、 链霉素10×104 U/(kg•d)，所有动物分笼饲养。造模后每日驱 赶动物活动2 h，共驱赶动物2周，2周后动物出现关节僵硬、 瘸行，关节周围可触及条索结节，X射线片显示下肢力线 右外翻10°变为内翻，提示造模成功。

1.4.2 各组干预方法

(1)针刀组：成功建模后第2天开始干预，首先暴露实 验动物右侧膝关节，观察右侧下肢是否出现肿胀、变形和 肌肉萎缩，对膝关节进行按压检查。触诊点：内外侧支持 带、内外侧膝眼；膝关节上方髌上囊、股四头肌各肌肌腹； 膝关节内侧股薄肌肌腹及止点、收肌肌群肌腹及止点和胫 骨平台附近。针刀松解每次选取上述部位病理性结节或条 索10个，常规消毒术，无麻醉。依照针刀操作流程先定点， 再定向，之后刺入靶点组织，以通透剥离手法加压切割病 变组织。屈伸牵张膝关节，每只兔子每次给予10 min手法 松解牵张。每周1次，持续5周。
(2)空白对照组及模型组：给予兔关节腔注射生理盐水 0.3 mL，每周1次，共5次。
(3)丹参注射液组：给予兔关节腔注射0.3 mL丹参注射 液，每周1次，共5次。
(4)针刀联合丹参注射液组：每周进行1次针刀治疗， 具体干预方法及干预频率同针刀组。每次针刀干预之后， 关节腔注0.3 mL丹参注射液。

1.4.3 兔膝关节软骨大体观察

干预结束后，麻醉下耳缘静脉空气栓塞处死动物。切开关节囊，暴露胫骨、股骨软 骨面，大体观察兔膝关节软骨面情况。

2 结果

实验选用新西兰白兔50只，分为 5组，实验过程无脱失，全部进入结果分析。空白对照组膝关节软骨无明显 磨损, 周围滑膜无明显增生及炎性改变。模型组液组膝关 节磨损较为严重，软骨破坏达到3级，但并未暴露软骨下骨, 周围滑膜增生及炎性改变较为明显。针刀组、丹参注射液 组、针刀联合丹参注射液组膝关节轻度磨损，1级到2级， 周围滑膜增生及炎性改变不明显，两组在大体观下无法辨 别磨损严重程度的差异。空白对照组 软骨表明光滑、软骨细胞梭形排列，形态、数目、结构基 本正常，无血管翳生成；模型组表层软骨细胞明显减少， 细胞排列紊乱；针刀组软骨表层较为光滑、软骨细胞数目 结构基本正常；丹参注射液组软骨表层光滑、软骨细胞排 列轻度紊乱，局部缺损；针刀联合丹参注射液组软骨表层 较为光滑，软骨细胞数量结构基本正常。见图1。病理切片 评分，丹参注射液组评分略高于针刀组和针刀联合丹参注 射液组，但此3组之间差异无显著性意义。见表1。


3 讨论

膝关节退行性骨关节炎是关节炎 中最常见的一种，也是造成膝关节疼痛、僵硬、功能丧失 的原因之一。随着全球老龄化的不断加重，国外有学者预 测到2030年，膝骨关节炎将成为人群中最主要的独立致残 原因，这将不仅影响个体的生活质量，还将增加全球医 疗保障体系的负担。传统上，膝关节退行性骨关节炎的治 疗包括语言治疗、物理治疗、康复、口服药物和手术治疗。 近十余年，随着对再生医学的研究加深，干细胞治疗膝关 退行性骨关节炎也展现出很大的潜力。虽然膝关节骨关节 炎的治疗方法很多，但胫骨高位截骨术、全膝关节置换等 治疗方法针对退行性骨关节炎终末期的患者、且对于适应 证和手术医师有严格的要求。在国内手术条件、患者 理念的影响下，可以行动的患者对开展手术的意愿并不 高。针刀手术及中药关节腔注射，作为国内独有的治疗 方法，有很好的群众基础。目前国内每年举办针刀培训班 超过千次，参加针刀培训的医师两万余人，接受针刀治疗 的患者数量无法统计。据估计，针刀已在英国等30多个国 家开展，正在逐渐走出国门、服务世界。因而研究针刀 技术对关节炎的治疗作用拥有很大的临床价值。对于关节 腔注射来说，中药注射为患者提供了关节腔注射透明质酸 和激素之外的第3个选择，已经被证明临床中有效且不存在关节腔注射激素的不良反应。此次实验中，两组疗法结 合优于单独使用一种疗法，因而关节腔注射和针刀疗法相 结合，经过不断完善，将希望成为膝骨关节病序贯治疗方 案的重要组成部分。