其林贝尔对串联质谱法测定面膜中10种荧光增白剂

荧光增白剂( FWAs) 是一种荧光染料，或称为白色染料，是一类复杂的有机化合物，其特性是激发 入射光线产生荧光，使所染物质获得类似荧石的效应，使肉眼看到的物质颜色很白，从而起到增白的作用，被广泛用于造纸、塑料、皮革、纺织、洗涤等行业。

1 实验部分

1. 1 仪器与试剂

6460 三重四极杆液质联用仪( 美国安捷伦公司) ; 5810Ｒ 冷冻离心机( 德国艾本德股份公司) ; Ｒ － 12 平行溶剂浓缩蒸发仪( 瑞士步琦有限公司) ; VOＲTEX KB － 3 涡旋振荡器( 中国海门其林贝尔仪器制 造有限公司) ，MS105DU 电子天平( 美国梅特勒公司) 。 10 种荧光增白剂标准品: C. I. 393( 纯度≥99. 7% ) 、C. I. 135( 纯度≥99. 8% ) 、C. I. 185( 纯度≥ 98. 1% ) 、C. I. 367( 纯度≥99. 9% ) 、C. I. 162( 纯度≥95% ) 、C. I. 368( 纯度≥97. 9% ) 购于上海安谱公 司; C. I. 71( 146 μg /mL) 、C. I. 113( 108 μg /mL) 、C. I. 353( 103 μg /mL) 、C. I. 220( 101 μg /mL) 为购于 福州绿川生物科技有限公司的混合对照品。甲醇、乙腈( 色谱纯，Merck 公司) ，PSA、C18 ( Welch 公 司) 。

1. 2 标准溶液配制

准确称取 10 种 FWAs 标 准 品，配成质量浓度为 1 mg /mL 的 标 准 储 备 液 ( C. I. 367、C. I. 393、 C. I. 368 用三氯甲烷溶解，C. I. 135、C. I. 185、C. I. 162、C. I. 71、C. I. 113、C. I. 353、C. I. 220 用乙腈 溶解) ，于 － 18 ℃冰箱中避光保存。 采用基质加标法配制标准工作曲线溶液，分别移取 10 种荧光增白剂标准储备液适量于 50 mL 棕色 容量 瓶 中，用 乙 腈 配 成 C. I. 393、C. I. 368 质 量 浓 度 为 1 μg /mL，C. I. 135、C. I. 185、C. I. 367、 C. I. 162 质量浓度为 100 ng /mL，C. I. 71、C. I. 113、C. I. 353、C. I. 220 质量浓度为 50 μg /mL 的混合标 准中间液; 称取与试样基质相应的阴性样品，加入混合标准中间液适量，与样品同步进行提取和净化。

1. 3 样品前处理

通过紫外灯照射发现，多数荧光增白剂吸附于面贴膜的载体( 基膜) ，故将面贴膜的载体( 基膜) 作 为研究对象，将其剪成 5 mm × 5 mm 大小见方，混合均匀。准确称取上述样品 2. 0 g( 精确至 0. 01 g) 置 于 50 mL 具塞比色管中，加入 10 mL 水和 10 mL 乙腈，再加入 2. 0 g NaCl 和 4. 0 g 无水 MgSO4，涡旋振 荡 5 min，以0 ℃ 12 000 r/min 离心5 min，上层清液转移至已提前放入200 mg C18、600 mg PSA 的离心管 中，涡旋振荡 5 min，以 0 ℃ 12 000 r/min 离心 5 min，上清液移至玻璃管中，于 40 ℃平衡定量浓缩仪中 浓缩至近干。残留物加 1. 0 mL 乙腈涡旋溶解，过 0. 22 μm 滤膜，待高效液相色谱 － 串联质谱仪测定。

1. 4 色谱 － 质谱条件

色谱条件: SB － C18 ( 2. 1 mm × 100 mm，1. 8 μm) 色谱柱; 柱温: 35 ℃ ; 进样量: 5 μL; 流速: 0. 3 mL /min; 流动相: A 为 10 mmol /L 乙酸铵溶液，B 为乙腈。梯度洗脱程序: 0 ～ 1. 0 min，90% A; 1. 0 ～ 2. 0 min，90%～ 50% A; 2. 0 ～ 4. 0 min，50% ～ 10% A; 4. 0 ～ 6. 0 min，10% A; 6. 0 ～ 8. 0 min， 10%～ 90% A; 8. 0 ～ 10. 0 min，90% A。 质谱条件: 电喷雾离子( ESI) 源; 多反应监测( MＲM) 模式检测; 雾化气温度: 325 ℃ ; 雾化器流 速: 6 L /min，喷雾电压: 45 psi; 鞘气温度: 350 ℃ ; 鞘气流速: 12 L /min。其余质谱参数见表 1。


2 结果与讨论

在相同色谱条件下对比安捷伦 SB － C18 ( 2. 1 mm ×100 mm，1. 8 μm) 和资生堂 MGⅢ( 2. 0 mm × 100 mm，3 μm) 2 种色谱柱对 10 种荧光增白剂的 分离效果。结果表明，4 种负离子扫描模式下的荧 光增 白 剂( C. I. 73、C. I. 113、C. I. 353、C. I. 220) 在 2 种色谱柱上均能实现基线分离，分离度良好; 6 种正离子扫描模式的荧光增白剂 ( C. I. 162、 C. I. 367、C. I. 393、C. I. 185、C. I. 135 和 C. I. 368) 在 MGⅢ色谱柱上不能完全分离，其中 C. I. 367 和 C. I. 393、C. I. 185 和 C. I. 135 难以实现基线分 离; 而 SB － C18色谱柱对此 6 种荧光增白剂均有 较好的保留特性( 图 1) 。

分别比较了 10 mmol /L 乙酸铵 － 乙腈、0. 1% 甲酸溶液 － 乙腈和水 － 乙腈 3 种流动相体系梯度洗脱 对 10 种荧光增白剂响应值和分离度的影响。结果显示，以 0. 1% 甲酸溶液 － 乙腈梯度洗脱时的响应值 较低，以水 － 乙腈梯度洗脱时，10 种荧光增白剂的响应值和分离度均不佳; 而采用 10 mmol /L 乙酸 铵 － 乙腈进行梯度洗脱，10 种荧光增白剂的响应值显著增加，峰形和分离度均得到显著改善，因此选 择 10 mmol /L 乙酸铵 － 乙腈作为流动相进行梯度洗脱。

3 结 论

本研究采用 QuEChEＲS 技术结合三 重四极杆液质联用仪，对面膜中 10 种荧 光增白剂进行分析检测，可在 10 min 内 完成 10 种荧光增白剂的有效分离。方法具有稳定性好、灵敏度高、特异性强、定性定量准确度高等特 点，适用于面膜中荧光增白剂的检测，可为化妆品中荧光增白剂检验标准的制定提供依据。