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用其林贝尔XW-80A对大肠菌群的探讨

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-02-28 08:56【

粪大肠菌群与大肠菌群相似,主要以其检出 情况来判断食品是否受到粪便污染。粪便中既有 正常肠道菌,也可能有肠道致病菌(如沙门氏菌、 志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等)。因此,食 品受到粪便污染就对食用者造成潜在的危害。通 常情况下,粪大肠菌群与大肠菌群相比,在人和 动物粪便中所占的比例较大,而且由于粪大肠菌 群在自然界容易死亡等原因,该菌群的存在可认 为食品直接或间接受到了近期的粪便污染。


1 材料与方法 


1.1 材料与设备 


1.1.1 实验材料 


大肠埃希氏菌(Escherichia coli): ATCC25922,美国ATCC标准菌株库;月桂基 硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤、EC肉汤培养基: 北京陆桥技术股份有限公司;无菌生理盐水 (0.85%NaCl)、无菌1mol/L NaOH、无菌1mol/L HCl。 


1.1.2 仪器设备 


LRH-150恒温培养箱:郑州生元 仪器有限公司;SHA-C恒温水浴箱:常州诺基仪 器有限公司;BXM-30R高压蒸汽灭菌器:上海博 讯实业有限公司医疗设备厂;SW-CJ-2D超净工作 台:沪净净化公司;JY 5002电子天平:上海良平 仪器仪表有限公司;HN-08均质器:上海汗诺仪 器有限公司;XW-80A振荡器:海门市其林贝尔仪器制造有限公司。 


1.2 检测方法 


1.2.1 国标方法(GB 4789.39—2013) 


将25 g(mL) 检样加入225 mL稀释液,均质,10倍系列稀释, 选择适宜3个连续稀释度的样品匀液,接种LST肉 汤管,每管接种1 mL(如接种量需要超过1 mL,则 用双料LST肉汤),(36±1)℃培养24~48 h,产气 管进行复发酵试验,取培养物1环,移种于EC肉 汤管中,(44.5±0.2)℃水浴培养(24±2)h,计EC发 酵管阳性管数,查MPN表报告结果。 


1.2.2 改进方法


将25 g(mL)检样加入225 mL 稀释液,均质,10倍系列稀释,选择适宜3个连续 稀释度的样品匀液,直接接种EC肉汤管,每管接 种1 mL(如接种量需要超过1 mL,则用双料EC肉 汤),(44.5±0.2)℃水浴培养(24±2)h,计EC发酵 管阳性管数,查MPN表报告结果。


2 结果与讨论


准备3份不同浓度大肠埃希氏菌(Escherichia coli)菌液,分别为低(0.36 MPN/mL)、中(9.3 MPN/ mL)、高(110 MPN/mL)3个浓度值,分别使用国标 方法和改进方法重复7次检测粪大肠菌群。对20个实际瓜子样品进行粪大肠 菌群检测,国标方法与改进方法的阳性发酵管数 存在不一致情况;国标方法检测瓜子中粪大肠菌 群阳性检出率为45%,改进方法检测瓜子中粪大 肠菌群阳性检出率为40%;整体趋势上,改进方 法测得结果略低于国标方法,但改进方法测得结 果均在国标方法95%置信区间内。


3 结论 


改进后检测方法与当前国 标方法相比,改进方法检测数值相关系数为 r=0.943,P=0.000,均在95%置信区间内,统计学 意义上无显著区别。国标方法(GB 4789.39—2013) 分为LST肉汤初发酵和EC肉汤复发酵两个过程, 操作步骤较复杂,工作量较大,干扰因素多,需 要经过48~72 h培养后才能得到测定结果,在进 行大批量瓜子样品检测时耗时较长[12-13] ;改进方 法是直接进行一步EC肉汤发酵过程,简单、快 捷、经济、高效,可在24 h内得到测定结果,可 用于实际瓜子样品大批量时的检测。





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