在小鼠体内的组织分析

1 材料 

1.1 仪器 

2695 型高效液相色谱（HPLC）仪（美国 Waters 公 司）；64R 型低温高速离心机（德国 Beckman 公司）； BT25S型电子天平（德国Sartorius公司）；HSC-12B型水 浴氮吹仪（上海旦鼎国际贸易有限公司）；QL-901 Vortex 型涡旋混合器（江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；T18型高速分散机（德国IKA公司）；Scientz-ⅡD型 超声波细胞破碎机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。 

1.2 药品与试剂 

AP 对照品（批号：2015109，纯度：≥99％）、AP 原料 药（批号：XC2014122，纯度：≥98％）均购自西安小草植 物科技有限公司；聚乙烯吡咯烷酮（PVP，天津博迪化工 有限公司）；水溶性维生素E（TPGS，美国Sigma公司）； 甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。 

1.3 动物 

清洁级昆明种小鼠，雌雄各半，2月龄，体质量（20± 2）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物使用 许可证号：SYXK（黑）2018-007。

2 方法与结果

色谱柱：Shimadzu ODS-SP（250 mm× 4.6 mm，5 µm）；流动相：甲醇-水（70∶30，V/V）；检测器：紫外检测器；检测波长：340 nm；柱温：35 ℃；流速：1.0 mL/min；进样量：20 µL。精密称取 AP 对照品 4.89 mg，溶于适量甲醇中，制成质量浓度为1 mg/mL的标准 溶液。用甲醇将上述标准溶液逐级稀释成不同质量浓 度的系列标准溶液，于4 ℃冰箱中保存，备用。取小鼠空白血浆100 μL至离 心管中，加入甲醇500 μL，涡旋振荡，混匀，以8 000 r/min 离心 5 min，吸取上清液，以氮气流吹干，残渣用甲醇 100 μL 复溶，以 10 000 r/min 离心 5 min，吸取上清液适 量，进行HPLC定量分析。

3 讨论

采用蛋白沉淀法对血浆/组织样品进行处理， 并比较了乙腈和甲醇作为沉淀剂的蛋白沉淀效果。结 果发现，以甲醇作为沉淀剂的效果更好，因此本研究选 择甲醇作为蛋白沉淀剂。由于AP的溶解性极差，且目前并无市售的口服制 剂，故本研究采用复合溶媒[聚乙二醇-乙醇-生理盐水 （5∶2∶3，V/V/V）]对 AP 原料药进行溶解。与常用乳剂 参比制剂相比，复合溶媒所含辅料少、制备方法简单且稳定性好，以复合溶媒溶解的AP溶液作为参 比制剂，进行体内组织分布研究及靶向性评价。

免责声明：文章仅供学习和交流，如涉及作品版权问题需要我方删除，请联系我们，我们会在第一时间进行处理。