硫磷的快速降解分析（其林贝尔QL-861使用）

1 材料与方法 

1． 1 材料与试剂 

有机磷水解酶( organophosphorus hydrolase，简 称 OPH)(酶活性≥11 μmol /min·mg)，购自北京森 根瑞亚公司;甲基对硫磷标准品( methyl parathion， 简称 MEP;CAS 号:298 － 00 － 0:购自天津一方恒益 医药技术有限公司;磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化 钠、三氯乙酸、碳酸钠、无水乙醇、亚硝酸钠等，均购 自天津市福晨化学试剂厂;4 － 硝基苯酚，购自成都 艾科达化学试剂有限公司;乙腈、丙酮(色谱纯) 购 自德国 Merck 公司。 

1． 2 仪器与设备 

主要的仪器有:Bio － rad 酶标仪(美国伯乐)、 Cp214 电子天平［奥豪斯仪器(上海) 有限公司制 造］、pHS － 3C 酸度计(上海佑科仪器仪表有限公 司)、YMDCY － 12S 水浴氮吹仪(上海育模仪器有限 公司)、HH － W600 数显恒温三用水箱(金坛市朗博 仪器制造有限公司);气相色谱仪(带氮磷检测器， 备有毛细管柱，美国 Thermo):TＲACE GC ULTＲA、 ＲE － 52A 型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)、 YDp － 02 型真空泵(上海育模仪器有限公司)、通风 柜(北京欧世佳实验室家具有限公司)、QL － 861 型 旋涡混合器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)、 YDp － 02 型 真 空 泵 ( 上海育模仪器有限公司)、 pHS － 3DW 型分析天平(上海仪电分析仪器有限公 司)。

2 结果与分析

随着 pH 值的升高， 有机磷水解酶对甲基对硫磷的降解率不断升高，当 pH 值为 8 时有机磷水解酶对甲基对硫磷的降解率 达到最高，为 95． 55% ，随着 pH 值的继续上升，有机 磷水解酶对甲基对硫磷的降解率逐渐下降。所以， 选择 pH 值为 8 进行后续试验。有 机磷水解酶对不同浓度甲基对硫磷进行降解，在 1 ～ 1 000 μg /mL 浓度范围内降解产物对硝基酚 450 nm 下的吸光度与甲基对硫磷浓度呈线性关系， 回归相关系数 r 2 = 0． 999 1。

3 结果与讨论 

通过对有机磷水解酶降解条件进行优化，得出 有机磷 水 解 酶 最 优 的 农 药 降 解 条 件: 酶 浓 度 为 1 ∶ 1 000、pH 值为 8、降解温度为 37 ℃、降解时间为 10 min。通过气相色谱法测得有机磷水解酶对 1、5、 10 μg /mL 甲基对硫磷的降解率均达到 98% 以上， 因此在生产中有机磷水解酶可作为针对甲基对硫 磷的高效快速降解酶进行推广使用。另外，利用有 机磷水解酶对甲基对硫磷具有高效降解特性，建立 了一种简便快速检测水果、蔬菜中甲基对硫磷残留 量的新方法。

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