其林贝尔

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蛋白酶解特性分析(其林贝尔振荡器使用)

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-04-14 10:17【

1 材料与方法 


1.1 主要原料与试剂 


罗非鱼鱼鳞(蛋白质含量 55.87%),湛江环球 水产有限公司;碱性蛋白酶 Alcalase 3L(酶活力为 3.0 AU/g), 诺维信公司; 马尿酸 (Hippuric acid, HA)、 马尿酰-组氨酰-亮氨酸 (N-hippuryl-HisLeu tetrahydrate,HHL)、 血管紧张素转换酶(Angiotensin Converting Enzyme from rabbit lung,ACE)、邻苯二甲醛(OPA)、抑肽酶、细胞色素 C、碳 酸酐酶、杆菌肽等均购于 Sigma 公司。 甲醇、乙腈 (色谱纯)。 


1.2 主要设备与仪器 


400Y 多功能粉碎机,永康市铂欧五金制品有 限公司;DGG-9123A 电热恒温鼓风干燥箱, 上海森信实验仪器有限公司;DSHZ-300A 旋转式恒温 振荡器, 太仓市实验设备厂;Fresco 21 冷冻高速 离心机,美国 Thermo Fisher 公司;QL-8bb-253 旋 涡振荡器, 海门市其林贝尔仪器制造有限公司; MLS-3781L 高压灭菌锅,日本 Panasonic 公司;紫 外分光光度计, 美国 ThermoFisher 公司;e2695 高 效液相色谱, 美国 Waters 公司;K-360 凯氏定氮 仪,K-425 快速消解仪,瑞士 BUCHI 公司。


2 结果分析


未经热处理时,鱼鳞蛋白蛋白 质回收率和水解度分别为 4.12%和 0.2%, 鱼鳞蛋白经不同高温处理 30 min 后,蛋白回收率和水解 度均有显著提高(P<0.05)。 当热处理温度由 25 ℃ 升高到 121 ℃时, 蛋白质回收率和水解度增大到 63.56%。进一步升高温度,蛋白质回收率变化不明 显,但水解度进一步增大。鱼鳞蛋白酶解产物蛋白回收 率和水解度在 25~121 ℃时随温度升高而快速上 升 , 进一步提高温度 , 二 者 变 化 均 不 显 著 (P > 0. 05)。


3 结语


对罗非鱼鱼鳞进行了不同条件的热处 理,并以蛋白回收率和水解度为考察指标,综合生 产成本和实际应用方面考虑, 确定最佳的热处理 条件为处理温度 121 ℃、处理时间 15 min,底物质 量分数 2%,在此条件下鱼鳞蛋白酶解产物蛋白回 收率达 65.93%,水解度为 10.54%,比未热处理组 分别提高了 78.29%和 89.23%,不同程度的热处理 对酶解产物的降血压活性均有一定程度的增强作 用, 其 中 121 ℃、15 min 处理增强效果最佳,其 ACE 抑 制 率 为 73.80%, 比未热处理组提高了 66.78%。






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