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海门其林贝尔XW-80A对水解酶活性分析

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-04-27 09:03【

1 材料与方法


实验中所使用的主要仪器及试剂有: SW-CJ 超净工作台(苏州安提空气技术有限公司)、SPX 系列生化培养箱(宁波江南仪器厂)、ELGA 超纯 水仪(英国 ELGA 公司)、XW-80A 旋涡振荡仪(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)、D3024 离心机 (Eppendorf 有限公司)、YXQG02 高压蒸汽灭菌锅 (致微仪器有限公司)、细菌 DNA 提取试剂盒(中 国天根生化科技有限公司)、真菌 DNA 提取试剂 盒 ( 北京方程生物科技有限公司 ) 、 API20NE (bioMerieux, 法国)、PCR 反应试剂(大连宝生物 工程有限公司)。细菌培养基(2216E 培养基): 蛋白胨 5 g, 酵 母粉 1 g, 琼脂 18 g, 陈海水 1 000 mL, 高温高压 灭菌 20 min。真菌培养基(PDA 培养基): 土豆 200 g, 葡萄糖 10 g, 琼脂 17 g, 陈海水 1 000 mL, 高温高压湿热灭菌 20 min。产酶培养基分别为: 产淀粉酶培养基, 产酪蛋白酶培养基, 产纤 维素酶培养基。


2 结果


将测得的细菌、真菌基因序列通过 Blast 程 序与 GenBank 中核酸数据库进行对比分析, 使用 N-J 法建树, 。获得的 78 株细菌(数据根据鉴定表来 确定)的序列在 NCBI 中选择与 GenBank 中的参考 菌株 16S rDNA 序列进行比较分析后, 其相似度 均在 98%—100%之间, 而 XD2、3D1 这 2 株菌株 相似度分别为 97%、95%, 可能代表了潜在的细 菌新物种。


3 讨论 


获得可培养微生物是微生物资源利用的基础, 在南极可培养微生物多样性研究方面, 目前取得 了一定的研究成果。本研究通过对南极罗斯海区 域沉积物的细菌、真菌进行分离、纯化和培养, 基 于 16S rDNA、ITS 基因序列进行了系统发育分析, 最终获得含有 13 个属的细菌 78 株、5 个属的真 菌 54 株。Bowman 等也利用 16S rDNA 分子鉴 定, 发现南极海冰中细菌种群的主要部分是 Proteobacteria 类群。






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