其林贝尔GL-3250C对免疫吸附分析

1 材料与方法

主要仪器设备：UV-2600紫外可见分光光度计 ［岛津企业管理（中国）有限公司］、Moshot MSX2型 倒置显微镜（广州市明美光电技术有限公司）、Infinite M200型酶联检测仪（瑞士TECAN公司）、CO2培 养箱（美国Thermo Fisher Scientific公司）、Agilent 6890N型气相色谱仪（美国Agilent公司）、GL-3250C 型磁力搅拌器（海门市其林贝尔仪器制造有限公 司）和移液器（德国Eppendorf公司）。

2 结果与分析

将载体蛋白BSA、OVA、合成半抗原及偶联产 物分别用PBS缓冲液调整浓度至1.0 mg/mL后，进行 紫外吸收光谱扫描。对硫磷合成半抗原 Hapten-PA、BSA和OVA的最大吸收峰分别在283、 285和286 nm处；免疫抗原PA -BSA、包被抗原PA - OVA的吸收曲线与相应的半抗原及载体蛋白相比， 均发生明显改变；PA-BSA和PA-OVA与各自载体蛋 白相比，在283~286 nm最大吸收峰的吸光值明显不 同，表明人工抗原合成成功。在融合前4 d进行小鼠血清效价与抑制率检测， 筛选效价高、抑制好的小鼠加强免疫。 融合小鼠的血清效价为8×103 ，当包被抗原PA-OVA （1.0 mg/mL）按1∶2000稀释、血清按1∶4000稀释时， 该融合小鼠血清对100 ng/mL对硫磷的抑制效率可 达50%，因此选择该稀释浓度下的抗原抗体组合进 行后续细胞筛选。

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