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其林贝尔GL-3250C对免疫吸附分析

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-07-08 09:21【

1 材料与方法


主要仪器设备:UV-2600紫外可见分光光度计 [岛津企业管理(中国)有限公司]、Moshot MSX2型 倒置显微镜(广州市明美光电技术有限公司)、Infinite M200型酶联检测仪(瑞士TECAN公司)、CO2培 养箱(美国Thermo Fisher Scientific公司)、Agilent 6890N型气相色谱仪(美国Agilent公司)、GL-3250C 型磁力搅拌器(海门市其林贝尔仪器制造有限公 司)和移液器(德国Eppendorf公司)。


2 结果与分析


将载体蛋白BSA、OVA、合成半抗原及偶联产 物分别用PBS缓冲液调整浓度至1.0 mg/mL后,进行 紫外吸收光谱扫描。对硫磷合成半抗原 Hapten-PA、BSA和OVA的最大吸收峰分别在283、 285和286 nm处;免疫抗原PA -BSA、包被抗原PA - OVA的吸收曲线与相应的半抗原及载体蛋白相比, 均发生明显改变;PA-BSA和PA-OVA与各自载体蛋 白相比,在283~286 nm最大吸收峰的吸光值明显不 同,表明人工抗原合成成功。在融合前4 d进行小鼠血清效价与抑制率检测, 筛选效价高、抑制好的小鼠加强免疫。 融合小鼠的血清效价为8×103 ,当包被抗原PA-OVA (1.0 mg/mL)按1∶2000稀释、血清按1∶4000稀释时, 该融合小鼠血清对100 ng/mL对硫磷的抑制效率可 达50%,因此选择该稀释浓度下的抗原抗体组合进 行后续细胞筛选。






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