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中药材木通鉴定-贝尔混合器应用

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-07-15 08:55【

1 仪器与试药


球 磨 仪 ( Retsch 公 司,德 国,型 号: MM400 型);涡旋混合器(海门市其林贝尔仪器制造 有限公司,型号:VORTEX-5 型);三温三控水槽(上海博迅实业有限公司医疗设备厂,型号:DK-8D 型);离 心机(Sigma 公司,德国,型号:1-14 型);聚合酶链反 应(PCR)仪(Bio-Rad 公司,美国,型号:T100 型);超 微量分光光度计( Thermo Fisher Scientific 公司,美 国,型号:Nanodrop One 型);电泳仪(北京六一生物 科技有限公司,型号:DYY-6C 型);凝胶成像仪(BioRad 公司,美国,型号:Gel DocTMXR + 型);电子天 平(赛多利斯科学仪器有限公司,德国,型号:SQP 型)。


2 方法与结果


测序峰图利用 CodonCode Aligner v. 8. 0. 2 软件进行校对拼接,切除 5. 8S rRNA 和 28S rRNA 区 域 获 得 ITS2 序 列,5. 8S motif 的 序 列 为 “CGAGGGCACGTCTGCCTGGGCGTCA”,28S motif 的 序 列 为“CGACCCCAGGTCAGGCGGGGCCACC”; 切 除 psbA 和 trnH 区域以获得 psbA-trnH 序列,psbA motif 的 序 列 为 “ TCGAGCTCCAGCGACAAATGGATAA”,trnH motif 的 序 列 为“GGCGGATGTACCCAAGTGGCTCAGG”。在中药材 DNA 条形码鉴定 系统( http: / /www. tcmbarcode. cn) 对所获得的序列 进行 BLAST 比对,利用 MEGA-X-10. 0. 5 软件构建 NJ 系统发育树。






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