中药材木通鉴定-贝尔混合器应用

1 仪器与试药

球 磨 仪 ( Ｒetsch 公 司，德 国，型 号: MM400 型);涡旋混合器(海门市其林贝尔仪器制造 有限公司，型号:VOＲTEX-5 型);三温三控水槽(上海博迅实业有限公司医疗设备厂，型号:DK-8D 型);离 心机(Sigma 公司，德国，型号:1-14 型);聚合酶链反 应(PCＲ)仪(Bio-Ｒad 公司，美国，型号:T100 型);超 微量分光光度计( Thermo Fisher Scientific 公司，美 国，型号:Nanodrop One 型);电泳仪(北京六一生物 科技有限公司，型号:DYY-6C 型);凝胶成像仪(BioＲad 公司，美国，型号:Gel DocTMXＲ + 型);电子天 平(赛多利斯科学仪器有限公司，德国，型号:SQP 型)。

2 方法与结果

测序峰图利用 CodonCode Aligner v. 8. 0. 2 软件进行校对拼接，切除 5. 8S rＲNA 和 28S rＲNA 区 域 获 得 ITS2 序 列，5. 8S motif 的 序 列 为 “CGAGGGCACGTCTGCCTGGGCGTCA”，28S motif 的 序 列 为“CGACCCCAGGTCAGGCGGGGCCACC”; 切 除 psbA 和 trnH 区域以获得 psbA-trnH 序列，psbA motif 的 序 列 为 “ TCGAGCTCCAGCGACAAATGGATAA”，trnH motif 的 序 列 为“GGCGGATGTACCCAAGTGGCTCAGG”。在中药材 DNA 条形码鉴定 系统( http: / /www. tcmbarcode. cn) 对所获得的序列 进行 BLAST 比对，利用 MEGA-X-10. 0. 5 软件构建 NJ 系统发育树。

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