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贝尔摇床的细胞比例对增强其毒性分析

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-11-23 08:54【

对象与方法


注射用醋酸西曲瑞克(GnRH-ant,Merck,德国), 人绝经期尿促性腺激素(human menopausal gonadotropin, HMG,丽珠医药集团股份有限公司),人绒毛膜促性腺激 素(human chorionic gonadotropin,HCG,丽珠医药集团 股份有限公司)。胞内染色试剂盒(BioLegend,美国), Annexin Ⅴ染色试剂盒 [ 赛默飞世尔科技(中国)有限公 司 ]。5- 溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodexyuirdine,BrdU, Sigma,美国),Ⅳ型胶原酶(Sigma,美国)。摇床(海门市其林贝尔仪器制造有限公司),低温离心机(Eppendorf, 德国),流式细胞仪(BD,美国)。使用眼科剪将收集的小 鼠子宫组织剪碎至约 1 mm3 碎块,经Ⅳ型胶原酶消化后 加入含 5% 胎牛血清培养液终止消化。


结果


以 CD45、CD3 和 NK1.1 标记小鼠 uNK 细胞后,采 用荧光标记的磷脂结合蛋白 Annexin Ⅴ染色,并用流式细 胞术检测 GnRH-ant 对 uNK 细胞凋亡的影响。结果显示,与对照组相比,GnRH-ant 组小鼠 uNK 细胞凋亡水 平下降(P=0.004)。Pf 和 Gz-B 是 NK 细胞发挥毒性作用的主要细胞因 子,本研究对小鼠 uNK 细胞内的这 2 个因子的表达水平 进行分析,结果显示,与对照组相比,GnRH-ant 组小鼠 uNK 细胞内 Pf(P=0.000)和 Gz-B(P=0.034)的 表达水平均较高。近年来,GnRH-ant 方案凭借其简便、灵活、安全、有 效等优势在辅助生殖领域得到了广泛应用,但 GnRH-ant 对内膜容受性的不利影响使得该方案的胚胎种植率及临床 妊娠率偏低 。与自然周期方案 组相比,GnRH-ant 方案组子宫内膜中多种与细胞黏附、信 号转导及 T 细胞受体信号通路相关的基因表达发生了显著变化






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