其林贝尔

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其林贝尔设备对于细胞胆固醇代谢的研究

返回列表 来源:未知 发布日期:2021-01-11 08:57【

材料与方法


荧光倒置显微镜,日本 Nikon 株式会社 ( 型号: Ti-U) ; 离心机,德国 Hettich zentrifugen 公司( 型 号: Rotina 420) ; CO2 细胞培养箱,德国美墨尔特公司 ( 型号: INCO 108) ; 生物安全柜,芬兰 Kojair Tech Oy 公 司( 型号: BioWizard Sliver SL-130 Class Ⅱ) ; 水浴锅,德 国美墨尔特公司( 型号: WNB29L4 L612.0144) ; 水平 摇床,中国其林贝尔公司( 型号: TS-2) ; 梯度 PCR 仪, 日本 Astec 公司( 型号: G02) ; 实时荧光定量 PCR 仪,美 国 ABI 公司( 型号: 7500 Fast Real-Time PCR System) ; 电泳槽,美国 Bio-Rad 公司( 型号: Mini-PROTEAN Tetra System) ; 显影仪,美国 Bio-Rad 公司( 型号: Chemidoc) , 半干转转膜仪,美国 Bio-Rad 公司( 型号: Trans-Blot SD Cell) 。将冻存的 HepG2 细胞放入 37 ℃ 水 中解冻,摇晃使其融化。用一次性移液器吸取多余培 养基至细胞瓶内( 剩余培养基为 5 mL 左右) ,将细胞瓶 放入显微镜下观察细胞状态,随后放入细胞培养箱。

其林贝尔脱色摇床TS-2型


结果


与空白对照组比较,各剂量 ox-LDL 诱导模型组 HepG2 细胞 miR-33a 基因表达量显著增加( P<0.01) 。 与模型组比较,辛伐他汀组显著降低 20、40、160 mg /L ox-LDL 诱 导 HepG2 细 胞 后 miR-33a 的 表 达 水 平 ( P<0.01) 。与 模 型 组 比 较,冠 心 康 显 著 下 调 各 组 HepG2 细胞 miR-33a 表达水平( P<0.01) 。组间 方 差 分 析 可 见,用 20 mg /L ox-LDL 诱 导 HepG2 细胞 24 h 后,模型组细胞出现 miR-33a 过表达 ( P<0.01) 。从 40 mg /L ox-LDL 诱导开始,模型组细胞 miR-33a 的表达受到抑制,但仍高于空白对照组,随着 浓度升高,该抑制效果逐渐减轻。microRNA 是一种长度约为 18 ~ 24 个核苷酸且广 泛参与外周血循环的微小非编码单链 RNA。miR-33 被广泛认为是脂质调节的一个重要调控因子,有学者 发现抗 miR-33 寡核苷酸可以大幅增加 HDL 水平。 其机制可能是 miR-33 在体内通过胆固醇逆向转运来 调节血浆 HDL 水平。当细胞内的胆固醇低于基 线水平时,miR-33a 抑制 NPC1 表达,一方面促进内源 性胆固醇合成和胞外摄取,另一方面抑制 27-羟基胆甾 醇,减少胆固醇流出。






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