涡旋混合器在去氢骆驼蓬碱聚乳酸纳米粒的制备

骆驼蓬 Peganum harmala L． 为蒺藜科骆驼蓬 属多年生草本植物，去氢骆驼蓬碱是其主要活性成 分之一，具有提高免疫、辐射防护、抗菌、抗肿 瘤、中枢兴奋等药理作用，但该成分水溶性很 差，生物利用度低下。因此，有必要采用制剂新技术来解决这一问题，推进它在临床上的应用。

Agilent 1260 型高效液相色谱仪 ( 美国 Agilent 公司) ; AＲ2140 型电子天平 ［梅特勒-托利多仪器 ( 上海) 有 限 公 司］; VOＲTEX-5 型 涡 旋 混 合 器 ( 海门市其林贝尔仪器制造有限公司) ; JY92-II 型 超声仪 ( 宁波新知科仪器研究所) ; YC-1200 型台 式冷冻干 燥 机 ( 北京亚星仪科科技发展有限公 司) ; Master-sizer 型粒度分析仪 ( 英国马尔文仪器 有限公司) ; MD200-2 型氮气吹扫仪 ( 杭州奥威仪器有限公司) ; 。 去氢骆驼蓬碱对照品 ( 批号 20170115，南京 泽朗医药科技有限公司，含有量＞ 98%) 。聚乳酸 ( 分子量 15 000，批号 2016081715，山东岱罡科技 有限公司) ; Poloxamer 188 ( 德国巴斯夫公司，含 有量 ＞ 98%) 。甲 醇 为 色 谱 纯; 其他试剂均为分 析纯。 SD 大鼠，雌雄兼具，体 质 量 ( 300 ± 20) g， 购自上海斯莱克实验动物有限公司，许 可 证 号 SCXK ( 沪) 2012-0002。

Waters C18 色谱柱 ( 250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ; 流动相甲醇-0. 2% 甲酸 ( 55 ∶ 45) ; 检测波长 248 nm; 体积流量 1. 0 mL /min; 柱 温 35 ℃ ; 进样量 20 μL。

精密称取去氢骆驼蓬碱对 照品 10. 0 mg，置于 10 mL 量瓶中，加入适量甲醇 超声溶解，室温下放置 40 min 后甲醇定容，精密 量取 适 量，甲 醇 稀 释 成 20. 0、10. 0、5. 0、0. 5、 0. 05 μg /mL，在 “2. 1. 1” 项色谱条件下进样测 定。以峰面积 ( Y) 对溶液质量浓度 ( X) 进行回 归，得方程为 Y = 1. 212 4X+0. 009 3 ( r = 0. 999 9) ， 在 0. 05～20. 0 μg /mL 范围内呈良好的线性关系。

取 0. 05、5. 0、20. 0 μg /mL 对照品溶液，在 “2. 1. 1”项色谱条件下进样测定 5 次，测得 3 种质量浓度下日内精密度 ＲSD 分别为 0. 43%、0. 19%、0. 17%，日间精密度 ( 连续测定 5 d，每 天 1 次) ＲSD 分 别 为 0. 82%、0. 37%、 0. 15%。取空白纳米粒混悬液或 1. 0%十二烷基硫酸钠水溶液 1 mL，加入 0. 5、5. 0、20. 0 μg /mL 对 照品溶液各 1 mL，测得去氢骆驼蓬碱平均加样回 收率为 99. 71%，ＲSD 小于 1. 76%。

精密称取去氢骆驼蓬碱 20 mg、聚乳酸 160 mg，溶于 25 mL 丙酮-乙醇等比 例混合溶液中，注射器缓慢加到 50 mL 含 0. 25% Poloxamer 188 的水相中，超声 10 min，减压旋蒸除 去有机溶剂，浓缩，离心 60 min ( 25 000 r/min) ， 沉淀物用蒸馏水洗涤后定容至 10 mL，以 5%甘露 醇为冻干保护剂，－70 ℃下预冻 48 h，挂入冷冻干 燥机中制备，即得，以去氢骆驼蓬碱计，含有量为 2. 88%。同法制备空白聚乳酸纳米粒。

取聚乳酸纳米 粒冻干前混悬液，蒸馏水适当稀释后放入比色池 中，测定粒径、PDI、Zeta 电位。 聚乳酸纳米粒粒径分布在 100 ～ 450 nm 之间，平均 粒 径 为 ( 195. 38 ± 2. 02 ) nm，PDI 为 ( 0. 131 ± 0. 034) ，Zeta 电位为 ( －19. 48±0. 36) mV。

本实验制备的去氢骆驼蓬碱聚乳酸纳米粒粒径 较小，分布均匀，可能是由于溶解药物、载体的丙酮和乙醇可在水相中迅速扩散，易得到较小的粒径; 水相中表面活性剂对纳米粒具有稳定作 用，不易发生粘连，平均粒径为 ( 195. 38± 2. 02) nm，而冻干后虽增加至 ( 203. 28 ± 3. 94) nm，但 粒径变化无显著差异 ( P＞0. 05) 。另外，混合溶剂 乙醇与丙酮的比例不可过高，以防聚乳酸析出; 水 相中表面活性剂浓度也不宜太高，防止增溶作用使 去氢骆驼蓬碱溶于水相，从而降低包封率、载药 量，经前期预实验考察，最终选择 0. 25%。



 

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