解毒护肝方经PPARs信号通路激

药物性肝损伤（Drug-induced liver injury，DILI） 是指过量或不当使用药物后，由其本身或代谢产物 引起的肝脏损伤。近年来 DILI 已成为严重威胁人类身 体健康的疾病之一。对乙酰氨基酚（acetaminophen， APAP）是临床上常用的解热镇痛药物，治疗剂量下安 全有效，但长期大量使用或联合用药时易诱发 DILI。近几十年来，APAP 引起的急性肝损伤已经 成为急性肝衰竭的主要原因 。

1 材料与方法

1.1 动物

Wistar 大鼠 60 只，雌雄各半，清洁级， 体质量（200±20）g，北京维通利华实验动物技术有限 公司提供，动物许可证号：SCXK（京）2012-0001， 动物质量合格证号：11400700181914。

1.2 药物与试剂

解毒护肝方，组方为柴胡 10 g、醋香附 15 g、炒白芍 15 g、五味子 10 g、黄芪 15 g、白 术 10 g、茵陈 15 g、黄芩 10 g、丹参 15 g、楮实子 10 g、生甘草 10 g，选用广东一方制药有限公司生产 的中药配方颗粒剂，生产批号分别为：17070084、 17110018、16120149、17100125、18010046、17090124、 17060195、17120138、17110024、11080711、17120058， 用 100 ℃蒸馏水冲泡，将配制好的药液置 4 ℃冰箱贮 存备用，1 周配 1 次。水飞蓟宾胶囊，天津天士力制 药股份有限公司生产，每粒含水飞蓟宾 35 mg，生产 批号：750709172，批准文号：国药准字 H20040299， 用蒸馏水配制，置 4 ℃冰箱贮存备用，1 周配 1 次。 对乙酰氨基酚片，石药集团欧意药业有限公司生 产 ， 每 片 含 对 乙 酰 氨 基 酚 0.5 g， 生 产 批 号 ： 016171002，批准文号：国药准字 H13022763，用 40 ℃生理盐水配制，将配制好的药液置 4 ℃冰箱贮 存备用，1 周配 1 次。 AST 试剂盒（批号：AUZ3645）、ALT 试剂盒（批 号：AUZ3689），贝克曼库尔特实验系统有限公司； TP 试剂盒（批号：120441）、ALB 试剂盒（批号： 131311），中生北控生物科技股份有限公司；DBIL 试 剂盒（批号：A006），长春汇力生物技术有限公司； Rat IL-6 试剂盒（批号：BE45361）、Rat TNFα 试剂 盒（批号：BE45471），德国 IBL International GmbH 公司；Rat 5-LOX 试剂盒（批号：SEB355Ra），武汉云 克隆科技股份有限公司；白三烯 B4 试剂盒（批号： 520111）， 美 国 Cayman Chemical Company 公 司 ；Trizol （批 号 ： 139603）， 美 国 Invitrogen 公 司 ； TIANScript cDNA 第 一 链 合 成 试 剂 盒（ 批 号 ： P5011）、 SuperReal PreMix Plus（SYBR Green）（批 号：Q5922），天根生化科技（北京）有限公司；氯 仿、异丙醇、无水乙醇，天津市永大化学试剂有限 公司等。

1.3 仪器

Humalyzer2000 半自动生化仪，德国豪迈 公 司 ； DP73 数 码 显 微 镜 ， 日 本 Olympus 公 司 ； HMIAS-2000 显微图像分析系统，武汉同济医科大 学；756MC 型紫外-可见分光光度计，上海精密科学 仪器有限公司；ELx800 酶标仪，美国 BIO-TEK 公 司；HH · W21 · 600 型电热恒温水箱，余姚市东方 电工仪器厂；MDF-382E 型超低温保存箱，日本 SANYO 公司；1- 15K 型高速冷冻离心机，美国 Sigma 公司；其林贝尔QL-902 涡旋振荡仪，海门市其林贝尔仪器制造有限公司；石蜡切片机（Leica）、荧光定量 PCR 仪 ABI7500，美国 Applied Biosystems 公司等。

2 结果

2.1 一般情况观察

正常组大鼠毛发滑顺，有光泽， 精神状态良好，行动灵活，二便正常。与正常组比 较，模型组大鼠体质量减轻，毛发无光泽，精神状 态欠佳，喜卧；解毒护肝方和阳性药组大鼠能不同 程度地改善大鼠的毛发光泽度、精神状态、体质量 以及行动灵活性等情况。给予对乙酰氨基酚造模 前，经统计各组大鼠体质量差异均无统计学意义 （P > 0.05）；造模及给药 8 d 各组大鼠体质量差异亦 无统计学意义（P > 0.05）；造模及给药 15 d，模型 组、阳性药组、复方高剂量组的大鼠体质量已有降 低趋势（P > 0.05）。

2.2 解毒护肝方对肝损伤大鼠肝功能的影响

与正常 组比较，模型组大鼠血清 AST、ALT、ALB 和 DBIL 含量明显升高（P＜0.05，P＜0.01），提示肝损伤模型 复制成功。与模型组比较，复方低、中剂量组能显著降低大鼠血清 AST、ALT 活性（P＜0.05，P＜0.01）；复方低剂量组显著降低 DBIL 含量（P＜0.05）； 复方 高剂量组对血清 AST、ALT 活性和 ALB 含量有降低 趋势，但差异无统计学意义（P > 0.05）；阳性药组能 明显降低大鼠血清 AST、ALT 活性和 ALB 含量（P＜ 0.05）。表明解毒护肝方能有效地改善 APAP 所致肝 损伤大鼠的肝功能。

3 讨论

中医无“药物性肝损伤”之病名，据临床表现可 将其归为“黄疸”“积聚”“胁痛”“药物毒”等范 畴，常见的临床证型有肝郁脾虚证、肝肾阴虚证、 气滞血瘀证、湿热蕴结证、热毒炽盛证五种，应辨 证施治。本课题组认为本病的发生多由短期过量用 药、药毒过猛或长期用药、药毒蓄积，导致肝体受 损，肝失疏泄，气机不畅或血络瘀滞；木遏则土 壅，土壅则脾失健运，而致湿浊内生，湿蕴而化 热。因此，肝脾失调、湿热毒瘀为其主要病机，疏 肝健脾、理气活血、除湿解毒为有效治法。解毒护 肝方是在逍遥丸、小柴胡汤、茵陈蒿汤三方基础上 化裁而成，方中柴胡、香附疏肝解郁、条达肝气， 为君药；炒白芍、五味子养阴柔肝，黄芪、炒白术 健脾益气，共为臣药；黄芩、茵陈清热除湿，楮实子益肾清肝，丹参清热凉血、活血祛瘀，共为佐 药；生甘草清热解毒，并能调和诸药，为使药。诸 药合用，共奏疏肝健脾、解毒除湿、活血祛瘀之功。



 

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