浅谈月腺大戟的化学成分的分析

月腺大戟为大戟科大戟属多年生草本植物，生于山坡、草地或林 下，分布于全国，主要产地为安徽、江苏、河南、湖北、 山东等省。月腺大戟作为传统中药已有２０００年历 史，始记载于《神农本草经》：根入药，性平，味辛，有 大毒。功能主治：逐水散结，破积杀虫。用于治疗 消化不良、水肿、咳嗽、哮喘、皮癣、皮炎等疾病，对于结核和癌症的治疗亦有明显效果。

ＡＶＡＮＣＥＩＩＩ６００高分辨核磁共振波谱仪系统 （德国布鲁克科技有限公司）；Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０高效液相 色谱仪、Ａｇｉｌｅｎｔ６２２０飞行时间质谱仪（美国安捷伦 科技有限公司）；ＬＣ－２０ＡＰ制备液相色谱仪（日本岛 津公司）；ＳＭＡＲＴ－Ｎ 超纯水机（香港力康生物医 疗 科技控股有限公司）；ＲＥ－５２型旋转蒸发仪（上 海 申 生 科 技 有 限 公 司）；Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ ＭＫ３ 酶 标 仪 （美 国 Ｔｈｅｒｍｏ）；ＣＯ２培养箱（美国 Ｔｈｅｒｍｏ）；ＴＳ－１００摇床 （海门其林贝尔）；ＸＤＳ－２００倒 置 显 微 镜（上 海 蔡 康 光学）；ＳＢ３２００－Ｔ 超 声 发 生 器（上 海 科 导，５０ＫＨｚ， １２０ Ｗ）；１８ＸＷ－８０Ａ 型 旋 涡 混 合 器 （海 门 其 林 贝 尔），ＡＥ２４０型十万分之一电子天平（瑞士梅特勒）；全 自动手持式细胞计数器Ｓｃｅｐｔｅｒ２．０（美国 Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）。

所用试剂（江苏强盛功能化学股份有限公司）均 为分析纯试剂，水为本实验室制备的超纯水。玻璃 层析柱（江苏南通三晶玻璃仪器有限公司）；Ｋｒｏｍａ－ ｓｉｌ１００－５Ｃ１８制备柱（５０ｍｍ×２５０ｍｍ）；柱层析用硅 胶、硅胶 ＧＦ２５４薄 层 板（山 东 烟 台 江 友 化 工 有 限 公 司）；羟丙基葡聚糖凝胶ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０（上海国药 集团化学试 剂 有 限 公 司），反 相 Ｃ１８硅 胶（日 本 大 曹 株式会社）。 乳腺癌细胞株 ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、Ｓｕｍ１４９、ＭＣＦ７、 ＺＲ－７５－１、ＳＫＢｒ３、ＢＴ４７４（南京科佰生物科技有限公 司，来源 ＡＴＣＣ）；紫 杉 醇（北 京 谱 析）；澳 洲 胎 牛 血 清、ＤＭＥＭ 培养基、ＰＢＳ溶液、０．５％胰蛋白酶（美国 Ｇｉｂｃｏ公司）。 中药月腺大戟饮片购自安徽（产地山东，批号： ２０１４０８１１），经第二军医大学药学院生药教研室的韩 婷副教授 鉴 定 为 大 戟 科 大 戟 属 植 物 月 腺 大 戟ｅｕ－ ｐｈｏｒｂｉａｅｂｒａｃｔｅｏｌａｔａ Ｈａｙａｔａ．的干燥根。

取月腺大戟药材３０ｋｇ粉碎后，用８倍量体积分 数为８０％的乙醇于６５℃下依次热提２次，每次２ｈ，合 并２次滤液减压回收溶剂至无醇残留，得浓缩液体积 ７Ｌ。取浓缩液２Ｌ，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇 各萃取３次，每次加入萃取溶剂体积２Ｌ。分别合并 各萃取层溶液，减压回收溶剂，得石油醚浸膏５０ｇ，乙 酸乙酯浸膏１３５ｇ，正丁醇浸膏２５０ｇ。 取乙酸乙酯浸 膏１３５ｇ过正相硅胶柱层析（石 油醚：乙酸乙酯，５０∶１～１∶１洗脱），得到９个馏分 Ｆｒ１－Ｆｒ９，分别取 Ｆｒ１（２０ｇ）、Ｆｒ２（２０ｇ）用石油醚∶ 乙酸乙 酯 ∶ 甲 醇（从 石 油 醚 ∶ 乙 酸 乙 酯 ∶ 甲 醇 ＝ １００∶１∶１，５０∶１∶１，２０∶１∶１；１０∶１∶１；２∶１∶ １；１∶１∶１，每个体积约１．５Ｌ）梯度洗脱，Ｆｒ１分离 得到化合物７（１７０ｍｇ），８（５２ｍｇ），９（６０ｍｇ）；Ｆｒ２ 分离 得 到 化 合 物 １ （４５ ｍｇ）；取 Ｆｒ３（１５ｇ）、Ｆｒ４ （１５ｇ）经反相 Ｃ１８硅胶用氯仿：甲醇（氯仿：甲 醇＝ ２０∶１；１０∶１；５∶１；２∶１；每 个 体 积 约１．５Ｌ）梯 度 洗脱，从Ｆｒ３中分离得到化合物５（３７ｍｇ），６（４５ｍｇ）； 从 Ｆｒ４中得到化合物 ２（３４ｍｇ），３（２７ｍｇ）；从Ｆｒ９ （１５ｇ）中经反相 Ｃ１８硅胶用甲醇洗脱分离得到３个 馏分：Ｆｒ９－１，Ｆｒ９－２，Ｆｒ９－３；对 Ｆｒ９－１ （１．２ｇ），Ｆｒ９－２ （１．５ｇ）用 ＬＨ－２０柱，采用甲醇水（甲醇：水＝５０％， 洗脱体积８Ｌ）洗脱，最后得到化合物４（２５ｍｇ），１０ （２６ｍｇ）。

采用 ＡｇｉｌｅｎｔＨＰＬＣ－ＥＳＩ－ＴＯＦ／ＭＳ对月腺大戟 中分离得到的１０个单体化合物进行分子量和分子 式的分析，采用 ＢｒｕｋｅｒＡＶＡＮＣＥＩＩＩ６００ 高分辨核 磁共振波谱仪采集１ Ｈ－ＮＭＲ 谱 与１３Ｃ－ＮＭＲ 谱 数 据。结合理化性质及现有文献中报道的核磁数据， 对化合物进行结构解析。 化合物１：无色针晶，Ｃ１０Ｈ１０Ｏ５，ＥＳＩ－ＭＳ的质核 比 （Ｍ／Ｚ）为 ２１１．０５３１ ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ 。１ Ｈ－ＮＭＲ （６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δ，ｐｐｍ）：１５．３９ （１Ｈ，ｓ，３－ＯＨ）， １３．０１（１Ｈ，ｓ，３－ＣＨＯ），１０．２０ （１Ｈ，ｓ，４－ＯＨ），５．９０ （１Ｈ，ｓ，Ｈ－５），３．９８ （３Ｈ，ｓ，６－ＯＣＨ３），２．６２ （３Ｈ，ｓ， １－ＣＯＣＨ３）．１３Ｃ－ＮＭＲ （１５０ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δ，ｐｐｍ）： ２０４．８，３４．２ （１－ＣＯＣＨ３ ），１９４．０ （３－ＣＨＯ），１７２．８ （Ｃ－４），１７１．７ （Ｃ－６），１６９．９ （Ｃ－２），１０６．５ （Ｃ－３）， １０５．９（Ｃ－１），９２．２ （Ｃ－５），５７．６ （６－ＯＣＨ３）．以上数 据与文献基本一致，鉴定化合物为２，４－二羟基－６－ 甲氧基－３－甲酰基苯乙酮。

本次研究采用多种分离技术和鉴别方法对月腺 大戟的化学成分开展了进一步研究，从中分离１０个 化合物，并对其进行结构解析。其中分析得到４个 苯乙酮类化合物，３个二萜类化合物，１个三萜类化 合物和２个脂肪酸酯类化合物。化 合 物 ６、７、８、１０ 为首次从该植物中分离得到。采用 ＭＴＴ 法选用６ 种乳腺癌细胞 测 试 ４ 个苯乙酮类化合物的抗乳腺 癌活性，化合物３显示出明显的抗乳腺癌活性，化合 物 ４对乳腺癌细胞抑制活性较弱，化合物 １和化合 物 ２未表现出生物活性。化合物 １和 化 合 物 ２均 为单苯乙酮化合物，化合物 ３和化合物 ４均为双苯 乙酮类化合物，化合物 ３为对称的甲基取代对称的 双苯乙酮，化合物 ４为非对称的无甲基取代对称的 双苯乙酮，化合物３对抗乳腺癌细胞的生物活性较 化合物 ４显著，而单苯乙酮类化合物 １和化合物 ２ 对乳腺癌细胞未表现出抑制活性。



 

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