分享淋巴细胞亚群正常参考值范围

近年来，随着肿瘤发病率和致死率的逐渐上升，对 于肿瘤的治疗方法也有了新的研究进展。免疫治疗已 经成为除了手术治疗、放疗、化疗之外的第四大肿瘤治 疗方法。免疫检查点抑制: PD-1 / L1、CTLA-4 等已在黑 色素瘤、肾癌、肺癌等肿瘤中达到长期治疗效果; 此外 CAＲ-T、TCＲ-T、肿瘤疫苗等免疫治疗技术的基础和临床研究也逐渐成为焦点。

1 资料与方法

1． 1 对 象

选取 2018 年 7 月至 2018 年 10 月于山西省肿瘤 医院体检中心进行常规体检的健康成人共 1 238 例， 其中女性 855 例，男性 383 例，年龄 27 ～ 90 岁，平均 年龄 41． 67 岁，分为 3 个年龄段: 第一组: 年龄 ＜ 39 岁( n = 400) ; 第二组: 年龄 40 ～ 59 岁( n = 560) ; 第三 组: 年龄 ＞ 60 岁( n = 278) 。所有研究对象均满足以下条件: 排除恶性肿瘤、自身免疫性、感染性及代谢性 疾病; 血细胞计数检查以及肝、肾功能检查均正常者; 排除激素类药物及免疫调节剂使用史者; 排除非山西 籍健康成人。

1． 2 仪器及主要试剂

FASC CantoⅡ流式细胞仪、流式细胞仪校准微球: 美国 Becton-Dickinson( BD) 公司生产。KDC-1044 低速 离心机: 安徽中科中佳科学仪器有限公司生产。其林贝尔QL901涡旋振荡器: 海门市其林贝尔仪器制造有限公司生 产。采用六色荧光标记抗体，所采用的抗体包括: CD3 -FITC /CD16 + 56-PE / CD45- PerCP-Cy 5． 5 /CD4-PC7 / CD19-APC /CD8-APC-Cy7、流式细胞仪用红细胞裂解液 与绝对计数微球试剂盒: 北京同生时代生物技术有限公司生产。

1． 3 实验方法

( 1) 使用荧光微球对流式细胞仪进行校准，将流式 细胞仪调整至最佳工作状态。
( 2) 检测过程: 采用反向移液技术吸取 50μl 混匀 的 EDTA-K2 抗凝全血，加入绝对计数管底部，再加入 20μl 的六色荧光单克隆抗体，盖上管帽，轻轻涡动混匀 3 秒钟，室内避光孵育 25 分钟。向管内加入 450μl 流 式细胞仪用溶血剂，盖上管帽，轻轻涡动混匀 15 秒钟， 室温避光反应 10 分钟后上机检测。全血标本均要求 在早晨空腹 6∶ 30 ～ 7∶ 30 之间采集，采血后 24 小时内完 成检测。

1． 4 统计学分析

采用 SPSS24． 0 软件包。若服从正态分布，则用均 数 ± 标准差( x 珋± s) ，x 珋± 1． 96S 计算95% 参考值范围; 偏 态分布 以 中 位 数 ± 四 分 位 间 距［M ( P25，P75) ］计算 95% 参考值范围。正态分布数据两组间均数比较采用 两样本 t 检验，多组间均数比较采用方差齐性检验; 若 不服从正态分布，方差不齐，应用非参数分析( Wilcoxon 秩和检验) 对数据进行统计分析。以 P ＜ 0． 05 认为有 统计学意义。

2 结 果

2． 1 成年人外周血 T 淋巴细胞亚群的参考值范围

对 2018 年体检的健康成年人( n = 1 238) 外周血淋 巴细胞亚群的 95% 参考值范围进行计算，可作为本实 验室正常参考值的参考范围; 此外，分别将出不同性 别、不同年龄段的健康成年人 95% 参考值范围进行计算。

2． 2 不同性别健康成年人 T 淋巴细胞亚群的检测结果比较

对不同性别之间，将女性( n = 855) 和男性( n = 383) 外周血淋巴细胞亚群进行比较。可以看出，CD8 绝对计数、CD4 绝对计数和 CD19 绝对计数无显著差异 ( P ＞ 0． 05) ; CD3 + T 细胞相对计数和绝对计数、CD4 + T 细胞相对计数、CD8 + T 细胞相对计数和绝对计数、NK 细胞相对计数和绝对计数、CD19 细胞相对计数均存在 差异性( P ＜ 0． 05) 。

2． 3 不同年龄组健康成年人 T 淋巴细胞亚群的检测结果比较

对年龄 ＜ 39 岁( n = 400) 、40 ～ 59 岁( n = 560) 和年 龄 ＞ 60 岁( n = 278) 三个年龄段的外周血淋巴细胞亚群 进行比较。可以看出，不同年龄段的 T 淋巴细胞亚群 均存在差异性( P ＜ 0． 05) ; 同时，对不年龄段的 T 淋巴 细胞亚群进行两两比较。三个年龄组的 CD3 + T 细胞 相对计数和绝对计数均存在显著性差异( P ＜ 0． 05) ，具 有统计学意 义，且 呈 下 降 趋 势; 老 年 组( ≥60 岁) 的 CD4 + T 细胞相对计数和绝对计数、NK 细胞相对计数和 绝对计数、CD19 细胞相对计数和绝对计数与青年组 ( 27 ～ 39 岁) 、中年组( 40 ～ 59 岁) 均存在差异性( P ＜ 0． 05) ，除了 NK 细胞相对计数和绝对计数呈上升趋势 外，CD3 + T 细胞相对计数和绝对计数、CD4 + T 细胞相 对计数和绝对计数、CD8 + T 细胞相对计数和绝对计数、 CD19 + T 细胞相对计数和绝对计数、CD4 /CD8 比值均 呈下降趋势。

3 讨 论

健康成年人流式细胞技术免疫表型分型的结果有 助于免疫缺陷病、肿瘤、白血病、淋巴瘤患者等进行免 疫评估，但是采用流式细胞仪进行免疫分析，尚未建立 普遍可接受的参考值范围。T 淋巴细胞的正常参考 值范围不仅具有年龄、性别、种族、地域等差异，还有可 能受到吸烟、饮酒、感染、怀孕等各种因素的影响，考虑到各个实验室间的差异，现在建议在许多国家进行 以人口为基础的研究，并对单个实验室的参考值范围 进行标准化。因此，在健康成人中，根据年龄和性别确 定淋巴细胞参考值范围对于评估患者结果非常重要。



 

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