用其林贝尔混匀器对血清生化检测结果研究

临床实验室中的错误主要来源于分析前误差，分 析前误差可能导致结果不准确甚至系统性偏倚。分 析前阶段包含样本的处理和保存相关作用。为 保 持 样本的最佳性能，冷冻样本最好解冻１次。解冻循环 次数、保存温度已有研究［１－２］，近来也有报道了混匀对 保存温度的影响，但解冻时间及解冻后的充分混匀 描述模 糊。

１ 材料与方法 

１．１ 标本来源 

收集同日１００例已检测后无肉眼可 见溶血、脂血、黄疸门诊患者血清样本，充分混合混匀 后按每个 ＥＰ管０．５ｍＬ进行分装，共４００个 ＥＰ管。 

１．２ 仪器与试剂 

漩涡混匀器（海门其林贝尔），滚 筒式混匀器（江苏康健），分析仪器采用美国雅培（Ａｂ－ｂｏｔｔ）公司的ｃ１６０００全 自 动 生 化 分 析 仪。试 剂：清 蛋 白（ＡＬＢ）、丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、天 门 冬 氨 酸 氨 基转移酶（ＡＳＴ）、尿素氮（ＢＵＮ）、胆固醇（ＣＨＯＬ）、肌 酐（ＣＲＥＡ）、葡萄糖（ＧＬＵ）、钾（Ｋ＋ ）、钠（Ｎａ＋ ）、总胆 红素（ＴＢＩＬ）、三 酰 甘 油（ＴＧ）、超 敏 Ｃ－反 应 蛋 白（ｈｓ－ ＣＲＰ）的检测 试 剂 均 为 雅 培 原 装 配 套 试 剂。校 准 品： 雅培原装配套校准品。质控品：伯乐公司提供。 

１．３ 方法 

生化分析仪每日质控在控后，随机选取５ 个已分装的 ＥＰ管上机检测上述项目，检测结果均值 作为基线。将余下 ＥＰ管放置于塑料泡沫板上，于－ ２０ ℃冰箱冷冻过夜保存。次日，取出１０个 ＥＰ 管 悬 置于架子上，静置于室温（２４ ℃）无明显空气流动下， 以冰晶消失为终点，观察融解所需时间。取２０个 ＥＰ 管平均分成４份，１份垂直放置，余３份水平放置，解 冻１ｈ后，取 水 平 放 置 中 的 １ 份 用 漩 涡 混 匀 器 混 匀 ３０ｓ，１份用滚筒 式 混 匀 器 以５０ｒ／ｍｉｎ混 匀５ｍｉｎ，余 两份不混 匀 上 机 检 测，并 重 复 检 测 一 次。取 ２４０ 个 ＥＰ管水平放置解冻１ｈ后，由２０名实验人员手动颠 倒混匀２、４、６、８、１０、２０次后检测，并重复一次。取６０ 个 ＥＰ管垂直放置解冻１ｈ后，由５名实验人员手动 颠倒混匀２、４、６、８、１０、２０次后检测，并重复一次。取 １２个 ＥＰ管以 观 察 解 冻 所 需 最 少 时 间 按 水 平 和 垂 直 放置后由１名实验人员手动颠倒混匀２、４、６、８、１０、２０ 次后检测，并重复一次。

２ 结　　果

以冰晶消失为终点，０．５ｍＬ冰冻血清解冻所需 时间约１７～２３ｍｉｎ。因此，选择２５ｍｉｎ能 确 保 解 冻 完全。以临床检测项目允许总 误差 ＴＥａ的１／３作为判断标准，计算偏倚 Ｂｉａｓ。漩 涡与滚筒混匀除 ＡＬＴ 差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５） 但无临床差异外其他项目差异均无统计学意义（Ｐ＞ ０．０５）及 临 床 差 异；未 混 匀 临 床 差 异 不 可 接 受。不同人员在 颠 倒 混 匀２次 后，仅 ＡＬＢ 有 统 计 学 差异（Ｐ＝０．０４９）。此组内 ＡＬＢ的生物学变异偏倚范 围是－２．３％～１．２％，又 因｜－２．３％｜＞２％，故 有 临床差异。混匀４次及以上无统计学（Ｐ＞０．０５）及临 床差异。对上述有统计学差异的项目进行临床差 异 偏 倚 比 较 的 结 果 表 明：混 匀 ２ 次，ＡＬＢ（｜ －２．８０％｜ ＞ ２．００％）、ＣＨＯＬ （｜ － ３．１０％ ｜ ＞ ３．００％）、Ｎａ＋ （｜－２．００％｜＞１．３３％）的 临 床 差 异 仍 然存在，而 Ｋ＋ （｜－１．７０％｜＜２．００％）及 ＴＲＩＧ（｜－ ３．１０％｜＜４．６７％）的 临 床 差 异 可 接 受。混 匀２次 以 上，ｈｓＣＲＰ（２．４０％ ＜１０．００％）、ＡＳＴ （３．７０％ ＜ ５．００％）、ＴＲＩＧ（｜－１．５０％｜＜４．６７％）的临床差异均 可接受。

３ 讨　　论 　　

混匀是分析前的一个重要环节，如标本采集后的 混匀对溶血和检测的影响，解冻血浆混匀不充分可 能导致 ＶＷＤ 或 血 友 病 的 误 诊。冻 存 样 本 检 测 前 均需要充分混匀，质控品解冻后也需充分混匀，但 均未说明混 匀 方 式。漩涡混匀常 用 于 科 学 研 究 长 期冰冻保存的 样 本，滚 筒 混 匀在 血 液 混 匀 更 常 见。

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