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用其林贝尔混匀器对血清生化检测结果研究

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-02-26 10:04【

临床实验室中的错误主要来源于分析前误差,分 析前误差可能导致结果不准确甚至系统性偏倚。分 析前阶段包含样本的处理和保存相关作用。为 保 持 样本的最佳性能,冷冻样本最好解冻1次。解冻循环 次数、保存温度已有研究[1-2],近来也有报道了混匀对 保存温度的影响,但解冻时间及解冻后的充分混匀 描述模 糊。


1 材料与方法 


1.1 标本来源 


收集同日100例已检测后无肉眼可 见溶血、脂血、黄疸门诊患者血清样本,充分混合混匀 后按每个 EP管0.5mL进行分装,共400个 EP管。 


1.2 仪器与试剂 


漩涡混匀器(海门其林贝尔),滚 筒式混匀器(江苏康健),分析仪器采用美国雅培(Ab-bott)公司的c16000全 自 动 生 化 分 析 仪。试 剂:清 蛋 白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天 门 冬 氨 酸 氨 基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHOL)、肌 酐(CREA)、葡萄糖(GLU)、钾(K+ )、钠(Na+ )、总胆 红素(TBIL)、三 酰 甘 油(TG)、超 敏 C-反 应 蛋 白(hs- CRP)的检测 试 剂 均 为 雅 培 原 装 配 套 试 剂。校 准 品: 雅培原装配套校准品。质控品:伯乐公司提供。 


1.3 方法 


生化分析仪每日质控在控后,随机选取5 个已分装的 EP管上机检测上述项目,检测结果均值 作为基线。将余下 EP管放置于塑料泡沫板上,于- 20 ℃冰箱冷冻过夜保存。次日,取出10个 EP 管 悬 置于架子上,静置于室温(24 ℃)无明显空气流动下, 以冰晶消失为终点,观察融解所需时间。取20个 EP 管平均分成4份,1份垂直放置,余3份水平放置,解 冻1h后,取 水 平 放 置 中 的 1 份 用 漩 涡 混 匀 器 混 匀 30s,1份用滚筒 式 混 匀 器 以50r/min混 匀5min,余 两份不混 匀 上 机 检 测,并 重 复 检 测 一 次。取 240 个 EP管水平放置解冻1h后,由20名实验人员手动颠 倒混匀2、4、6、8、10、20次后检测,并重复一次。取60 个 EP管垂直放置解冻1h后,由5名实验人员手动 颠倒混匀2、4、6、8、10、20次后检测,并重复一次。取 12个 EP管以 观 察 解 冻 所 需 最 少 时 间 按 水 平 和 垂 直 放置后由1名实验人员手动颠倒混匀2、4、6、8、10、20 次后检测,并重复一次。


2 结  果


以冰晶消失为终点,0.5mL冰冻血清解冻所需 时间约17~23min。因此,选择25min能 确 保 解 冻 完全。以临床检测项目允许总 误差 TEa的1/3作为判断标准,计算偏倚 Bias。漩 涡与滚筒混匀除 ALT 差异有统计学意义(P<0.05) 但无临床差异外其他项目差异均无统计学意义(P> 0.05)及 临 床 差 异;未 混 匀 临 床 差 异 不 可 接 受。不同人员在 颠 倒 混 匀2次 后,仅 ALB 有 统 计 学 差异(P=0.049)。此组内 ALB的生物学变异偏倚范 围是-2.3%~1.2%,又 因|-2.3%|>2%,故 有 临床差异。混匀4次及以上无统计学(P>0.05)及临 床差异。对上述有统计学差异的项目进行临床差 异 偏 倚 比 较 的 结 果 表 明:混 匀 2 次,ALB(| -2.80%| > 2.00%)、CHOL (| - 3.10% | > 3.00%)、Na+ (|-2.00%|>1.33%)的 临 床 差 异 仍 然存在,而 K+ (|-1.70%|<2.00%)及 TRIG(|- 3.10%|<4.67%)的 临 床 差 异 可 接 受。混 匀2次 以 上,hsCRP(2.40% <10.00%)、AST (3.70% < 5.00%)、TRIG(|-1.50%|<4.67%)的临床差异均 可接受。


3 讨  论   


混匀是分析前的一个重要环节,如标本采集后的 混匀对溶血和检测的影响,解冻血浆混匀不充分可 能导致 VWD 或 血 友 病 的 误 诊。冻 存 样 本 检 测 前 均需要充分混匀,质控品解冻后也需充分混匀,但 均未说明混 匀 方 式。漩涡混匀常 用 于 科 学 研 究 长 期冰冻保存的 样 本,滚 筒 混 匀在 血 液 混 匀 更 常 见。





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