镉离子的核酸适配

实验部分

TC-XP-G PCＲ 仪( 杭州博日科技有限公司) ; VOＲTEX-5 旋涡混合仪( 海门市其林贝尔仪器制造有 限公司) ; FA2204B 电子天平( 杭平公司) ; S210 pH 计( 梅特勒-托利多仪器有限公司) ; CHI660E 电化 学工作站( 上海辰华仪器有限公司) ; TGL-16G 高速离心机( 上海安亭科学仪器厂) ; Savant AA 石墨炉 原子吸收分光光度计( 澳大利亚 GBC 科学仪器公司) 。 三羟甲基氨基甲烷( Tris) 、巯基己醇( MCH) 、三-( 2-甲酰乙基) 膦盐酸盐( TCEP) ( Sigma-Aldrich 公 司) ; K3［Fe( CN) 6］、KCl、NaCl、CdCl2、HgCl2、ZnCl2、CuCl2、FeCl2、Pb( Ac) 2、H2O2( 30%) 、浓 H2 SO4、无水 乙醇、NaH2PO4、K2HPO4 ( 国药集团化学试剂公司) 。所用试剂均为分析纯; 实验用水为超纯水 ( ≥18．3 MΩ·cm) 。

结果与讨论

采用竞争法实现响应信号“Turn off”变化，发展 了一种检测 Cd2+ 的电化学生物传感器。5'端修饰巯基的 CDNA 通过 AuS 键固定在金电极上，随后将适配体 Cd Apt 滴加到电极表面，与 CDNA 通过碱基互补配对，形成部分互 补的双链 DNA，刚性的双链结构可极大地增加电极表面直立状态 DNA 的数量。由于 Cd Apt 的 3'端修 饰有 Fc，Fc 靠近电极，引起高强度的信号; 当 Cd2+ 存在时，Cd Apt 与 Cd2+ 发生特异性结合，破坏 DNA 的双链结构，使 Cd Apt 游离出来，修饰电极 Fc 的电流信号随之减弱，使用 SWV 法通过检测信号的变 化实现对 Cd2+ 的快速、灵敏检测。相比于电极表面直接修饰适配体序列，利用竞争法，靶分子与适配 体结合，与互补序列分离，有利于增强电极表面电阻抗的变化程度，提高了灵敏度。

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